A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 01:11Principle of the Random Conical Tilt Method
- 02:10Preparation of Holey Carbon Grids Covered with Thin Carbon
- 05:08Negative Staining of the Exosome Complex
- 06:23Electron Microscopy of the Exosome Complex
- 08:10Image Processing of the Data
- 10:55Representative Results for Single Particle Electron Microscopy Reconstruction of the Exosome Complex Using the Random Conical Tilt Method
- 11:29Conclusion
Dit artikel beschrijft een standaard methode om een drie-dimensionale (3D) reconstructie van biologische macromoleculen met behulp van negatieve kleuring van elektronenmicroscopie (EM) te krijgen. In dit protocol leggen we uit hoe u de 3D-structuur van de Saccharomyces cerevisiae exosome complex krijgen op medium resolutie met behulp van de random conische kantel reconstructie methode (RCT).
