A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 01:24Splenic B-Lymphocyte Isolation and Stimulation
- 05:42Transfection of Producer Cells
- 07:26Infection of Stimulated Splenic B cells
- 08:12Flow Cytometry Analysis
- 08:40Rescue of AID-Deficiency by Transduction of AID-Deficient B Cells with a Recombinant Retrovirus
- 08:57Conclusion
מערכת יעילה של מבנה וניתוח פונקציה של גן ב<em> לשעבר vivo</em> התרבות של לימפוציטים-B הטחול מתואר. שיטה זו מנצלת את ייצור רקומביננטי retroviral ב חופשית עוזר, קו אריזה ecotrophic התא. יציבה, תורשתי הביטוי של הגן של עניין בתוך לימפוציטים העיקרית היא להשיג מוביל לדור של נוגדנים על פני תאים B עוברת לעבור רקומבינציה בכיתה.
Tags
Recombinant Retroviral ProductionB CellsTransgenic ExpressionReverse Genetic ApproachHeterologous Expression SystemPhenotype AnalysisGene Over-expressionHematopoetic SystemMouse GeneticsHuman Genes And DiseasesSynteny ConservationGene DisruptionsAllelic ReplacementTransgenic Mouse CreationCell Culture Model
