この記事では、三齢ショウジョウバエの幼虫から中枢神経系を解明する方法を示します。
ショウジョウバエの幼虫の中枢神経系(CNS)は、複雑でほとんどわかっていない。 CNSを調査する一つの方法は様々な小説やマーカータンパク質の発現を調べるために免疫組織化学を使用することです。タフなキューティクルが体腔内に侵入から抗体を妨げるため、全体の幼虫の染色は、非現実的です。これらの組織を染色するためには、固定と染色の前に動物を解剖することが必要である。この記事では、中枢神経系を損傷することなく、ショウジョウバエの幼虫を解剖する方法を示します。細かいピンセットで半分に幼虫を引き裂くことによって開始し、CNSを公開するために、キューティクル"インサイドアウト"をオンにします。解剖が注意深く行われている場合、CNSがキューティクルに接続されたままになります。我々は通常、固定と染色ステップを通して表皮に接続されている中枢神経系を維持、そして唯一の完全なガラススライド上にサンプルをマウントする直前に、キューティクルからCNSを削除します。我々はまた、イブ、中枢神経系における神経細胞のサブセットに発現する転写因子で染色された幼虫の中枢神経系のいくつかの代表画像を示す。資料では、この方法の実用的な使用方法と発生する可能性がある潜在的な問題のいくつかの議論で締めくくります。
このビデオでは、三齢ショウジョウバエの幼虫からCNSを分析する方法を示しています。解剖後、CNSは、標準の免疫組織化学のプロトコールを用いて染色することができます。現在、多くのまだそれは情報を格納して送信する方法成体神経系はだけでなく、どのように生成されるかについては不明です。開発ショウジョウバエ幼虫の中枢神経系の研究は、神経系の配線や機能の知識を強化していくべき。
The authors have nothing to disclose.