Summary

小鼠表皮神经嵴干细胞(EPI的非公务员合约雇员)文化

Published: May 09, 2008
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Summary

在这里,我们显示我们的方法分离出小鼠表皮神经嵴干细胞(EPI的非公务员合约雇员)。技术涉及微解剖胡须毛囊,孤立的隆起和placeing组织培养。 EPI的非公务员合约开始从到底层的隆起植移民,在3 – 4天。

Abstract

EPI的非公务员合约雇员是在成人的位置,毛囊隆起的胚胎神经嵴的残余。他们是多能干细胞具有产生分化的细胞类型广泛,包括神经元,神经细胞,平滑肌细胞,骨/软骨细胞和黑色素细胞的生理属性。 EPI的非公务员合约雇员在毛茸茸的皮肤很容易访问的,并可以作为分离出高纯度的干细胞人口。此影片提供了一个详细的协议,准备从鼠标EPI的非公务员合约雇员的文化胡须毛囊。成年小鼠触须垫被删除,和胡须毛囊解剖。卵泡然后切横纵向和随后的上方和下方的凸起区域。凸起是从胶原蛋白胶囊,并在培养板中。 EPI的非公务员合约雇员3至4天后开始隆起植移民。

Protocol

从成年鼠晶须卵泡凸出的剖析我们使用10个星期到6个月大的老鼠。年轻的老鼠经常会产生更多的细胞。鼠标和淹没整个动物安乐死成1:1的优碘(碘伏溶液)和过氧化氢,约3分钟(从药房)的混合物。 水枪整个鼠标,特别是面部的地区,用75%乙醇,并进行鼠标在层流罩夹层显微镜。 解剖晶须垫,小心地避免切成头发灯泡的HBSS池。 在室温下的HBSS解剖胡须毛囊和游?…

Discussion

凭借其迁徙的能力,可以分离出高纯度的干细胞可以在体外培养扩增人口EPI的非公务员合约。作为在一个成人的位置胚胎残余,EPI -非公务员合约是为未来的细胞替代疗法,生物医学工程和/或再生医学的潜在吸引力的候选人。我们已经测试了EPI的非公务员合约雇员在脊髓损伤小鼠模型,它们显示的地方的理想特性。通过LongSAGE(www.ncbi.nlm.nih.gov / GEO,序列号GSE4680)的基因表达图谱,我们表明,正如所料,胚胎神?…

Acknowledgements

技术支持:USPHS授予NS38500,国家神经疾病研究所和中风,美国国立卫生研究院,美国威斯康星州东南的生物医学技术联盟,Milwauke,美国威斯康星州,密尔沃基雄鹿队拜伦Riesch瘫痪基金会,美国威斯康星州;鹰的兄弟订购,中西部章美国国立脊髓损伤协会,美国密尔沃基章,东北英格兰干细胞研究所,英国纽卡斯尔大学,英国。

References

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Cite This Article
Sieber-Blum, M., Hu, Y. Mouse Epidermal Neural Crest Stem Cell (EPI-NCSC) Cultures. J. Vis. Exp. (15), e772, doi:10.3791/772 (2008).

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