Summary

الوخز بالإبر في نموذج الفئران من الربو

Published: August 25, 2020
doi:

Summary

منصة عالية يمكن إصلاح الفئران دون قيود وفضح تماما نقاط الوخز بالإبر على ظهره أثناء التلاعب بالوخز بالإبر. توضح هذه المقالة أساليب تصنيع المنصة العالية ، وتضع نموذجا للفئران من الربو وتقيس التغيرات في وظيفة الجهاز التنفسي باستخدام نظام تصويرplethysmography (WBP) غير الباضع وفي الوقت الحقيقي.

Abstract

منصة عالية يمكن إصلاح الفئران دون قيود وفضح تماما نقاط الوخز بالإبر على ظهره أثناء التلاعب بالوخز بالإبر. توضح هذه المقالة أساليب تصنيع المنصة العالية ، وتضع نموذجا للفئران من الربو وتقيس التغيرات في وظيفة الجهاز التنفسي باستخدام نظام تصويرplethysmography (WBP) غير الباضع وفي الوقت الحقيقي.

Introduction

الربو هو مرض مزمن يتميز بتشذيب القصبات الهوائية ومجرى الهواء فرط الاستجابة1. يتم تشخيص ما يقرب من 339.4 مليون شخص في جميع أنحاء العالم مع الربو2. انتشار الربو يتزايد على الصعيد العالمي، مع 100 مليون حالة جديدة من المتوقع في العقد المقبل3. استنشاق الكورتيكوستيرويدات وطويلة المفعول β2 -ناهضاتلا تتحكم بفعالية في أعراض جميع المرضى4. لذلك ، فإن استخدام العلاجات البديلة مثل الوخز بالإبر لعلاج الربو يتلقى اهتماما متزايدا5. طريقة فعالة لعلاج الربو هو إبرة GV14 (داتشوي)، ثنائي BL12 (فنغمن) والثنائية BL13 (Feishu)6. الوخز بالإبر يقلل بشكل كبير من مستويات الغلوبولين المناعي إفراز A (SIgA) في اللعاب وإفرازات الأنف من المرضى الذين يعانون من الربو التحسسي ويقلل من عدد اليوزينيات الدم المحيطي مع معدل فعال إجمالي قدره 85٪6. الوخز بالإبر في BL13 و ST36 (زوسانلي) في الفئران مع الربو المزمن يقلل من مستوى IL-17 بنسبة 40٪ ويقلل من سمك العضلات الملساء بنسبة 33٪ مقارنة مع مجموعة ovalbumin (OVA)، وبالتالي تخفيف أعراض الالتهاب7،8. ومع ذلك ، فإن آلية علاج الوخز بالإبر للربو ليست واضحة تماما.

النماذج الحيوانية هي أداة هامة لأبحاث الربو9 لأنه يمكن استخدام النموذج الحيواني للقياس المستمر لوظيفة الجهاز التنفسي لتقييم فعالية علاج الربو10. وفي الوقت نفسه، تتطلب دراسات الفيزيولوجيا المرضية للربو عينات اختبار، بما في ذلك عينات من القصبة الهوائية والرئة والحمم القصبي للتحقق من التغيرات في مستويات العوامل الرئيسية11. وتستخدم عادة نماذج الفئران من الربو لتقييم الفيزيولوجيا المرضية الربو لأنها تنتج استجابات مجرى الهواء طويلة الأمد وتظهر استجابات مجرى الهواء الفوري والمتأخر12. ومع ذلك ، بسبب التحفيز التجريبي المتكرر ، غالبا ما تصبح الفئران مزعجة. لذلك ، هناك حاجة إلى طريقة مناسبة لإصلاح الفئران. وتشمل الأساليب الشائعة الاستخدام لتثبيت الفئران التخدير وربط13. على الرغم من أن طريقة التخدير توفر أفضل التعرض للنقاط الفطنة، فإنه قد يؤثر على التوصيل العصبي وتؤثر في نهاية المطاف على النتائج التجريبية14. طريقة الربط لا تحفز نفس الآثار الفسيولوجية مثل التخدير، ولكن الفئران المقيدة سوف تواجه توتر العضلات الهيكل العظمي. أيضا، الإبرة لا يمكن أن تصل بسهولة إلى الموضع المعين15. هنا ، نقدم منصة عالية يمكن استخدامها لإصلاح الفئران دون تقييدها وفضح النقاط الفطنة على الظهر بشكل كامل. يمكن وضع الفئران على منصة عالية أثناء إدارة الوخز بالإبر. المنصة العالية قادرة على استيعاب الجرذ فقط أثناء وقوفه ، وبما أنه يوضع على مسافة معينة من الأرض ، فإن الفئران لن تتحرك بسبب الخوف من المرتفعات16.

توضح هذه المقالة بالتفصيل تصنيع المنصة العالية ، وإنشاء نموذج الفئران من الربو ، وتشغيل الحاجة إلى فأر على المنصة العالية وقياس وظيفة الجهاز التنفسي باستخدام نظام تصوير الدمى الكامل (WBP).

Protocol

تم استعراض جميع التجارب على الحيوانات والموافقة عليها من قبل لجنة أخلاقيات التجارب الحيوانية في جامعة شنغهاي للطب الصيني التقليدي (رقم التخليص الأخلاقي PZSHUTCM190308020). 1. تصنيع منصة عالية تعيين طول وعرض الجهاز الداعم إلى 86 سم × 17 سم (الشكل 1</stro…

Representative Results

مع الوخز بالإبر في GV14، ثنائي BL12 والثنائية BL13 نقطة، والفأر يحافظ على موقف عرضة. الجرذ يمكن أن تطور رأسه فقط إلى الخارج وليس من الداخل لأنه يتم حظر اتجاه واحد مع لوحة خشبية (الشكل 5). ومع زيادة تركيز الميثاكولين، يظهر بنه اتجاها متزايدا ويزداد معدل النمو تدريجيا…

Discussion

تقع نقاط GV14 وBL12 الثنائية ونقاط الفطنة الثنائية BL13 المستخدمة في هذه الدراسة على الظهر ، وبالتالي فإن المنصة العالية مناسبة لإصلاح الفئران. في دراسات أخرى، يجب اختيار طريقة تثبيت كافية وفقا لموقف من نقاط15. بالنسبة للنقاط الفطنة على البطن ، يمكن وضع الجرذ لأسفل في مخروط أسود (عل?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم 81922076 ، 81973951 ، 81873373) ، مشروع بناء الابتكار التعاوني في شنغهاي (رقم ZYJKFW201811010، ZYJKFW201701005).

Materials

0.3 mm x 13.0 mm acupuncture needle China Suzhou Medical Device Factory
Al(OH)3 American Thermo 77161
Compression nebulizer Jiangsu Lude Medical Electronics Co., Ltd. NB-212C
Fine Pointe V2.0 American Buxco
Laboratory gas drying unit American Drierite 26800
Methacholine American Sigma MKCF6054
Ovalbumin American Sigma A5503-25G
Phosphate Buffer solution (1x) Gelifesciences SH30256.01
Seal box IRIS Corporation of Japan
Whole-body plethysmography respiratory function measurement system American Buxco

References

  1. Papi, A., Brightling, C., Pedersen, S. E., Reddel, H. K. Asthma. Lancet. 391 (10122), 783-800 (2018).
  2. . Global strategy for asthma management and prevention Available from: https://ginasthma.org/gina-reports/ (2019)
  3. Enilari, O., Sinha, S. The Global Impact of Asthma in Adult Populations. Annals of Global Health. 85 (1), (2019).
  4. . Global strategy for asthma management and prevention Available from: https://ginasthma.org/gina-reports/ (2020)
  5. Zhuang, Y., Xing, J. J., Li, J., Zeng, B. Y., Liang, F. R. History of acupuncture research. International Review of Neurobiology. 111, 1-23 (2013).
  6. Yang, Y. Q., et al. Considerations for use of acupuncture as supplemental therapy for patients with allergic asthma. Clinical Reviews in Allergy & Immunology. 44 (3), 254-261 (2013).
  7. Nurwati, I., et al. Reduction of interleukin-17 level by acupuncture at Feishu (BL13) is strengthened by acupuncture at Zusanli (ST36) in a mouse model of chronic asthma: An experimental study. Medical Acupuncture. 27 (4), 278-282 (2015).
  8. Nurwati, I., et al. Improvement in inflammation and airway remodelling after acupuncture at BL13 and ST36 in a mouse model of chronic asthma. Acupuncture in Medicine. 37 (4), 228-236 (2019).
  9. Reddy, A. T., Lakshmi, S. P., Reddy, R. C. Murine model of allergen induced asthma. Journal of Visualized Experiments. (63), e3771 (2012).
  10. Zhou, D. D., et al. Metallothionein-2 is associated with the amelioration of asthmatic pulmonary function by acupuncture through protein phosphorylation. Biomedicine & Pharmacotherapy. 123, 109785 (2020).
  11. Yin, L. M., et al. Transgelin-2 as a therapeutic target for asthmatic pulmonary resistance. Science Translational Medicine. 10 (427), (2018).
  12. Shin, Y. S., Takeda, K., Gelfand, E. W. Understanding asthma using animal models. Allergy Asthma & Immunology Research. 1 (1), 10-18 (2009).
  13. Cui, K. M., et al. Electro-acupuncture relieves chronic visceral hyperalgesia in rats. Neuroscience Letters. 376 (1), 20-23 (2005).
  14. Tobin, J. R., Martin, L. D., Breslow, M. J., Traystman, R. J. Selective anesthetic inhibition of brain nitric oxide synthase. Anesthesiology. 81 (5), 1264-1269 (1994).
  15. Dimitrov, N., Sivrev, D., Atanasova, D. Method of rat immobilization during experimental acupuncture. Scripta Scientifica Medica. 45, 105-108 (2013).
  16. Aguilar, R., et al. emotional reactivity and fear of heights: a factor analytic map from a large F(2) intercross of Roman rat strains. Brain Research Bulletin. 57 (2), 17-26 (2002).
  17. Lai, X., et al. Proteomic response to acupuncture treatment in spontaneously hypertensive rats. PloS One. 7 (9), 44216 (2012).
  18. Niu, C., et al. A novel uni-acupoint electroacupuncture stimulation method for pain relief. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2011, 209879 (2011).
  19. McFadden, E. R., Luparello, T., Lyons, H. A., Bleecker, E. The mechanism of action of suggestion in the induction of acute asthma attacks. Psychosomatic Medicine. 31 (2), 134-143 (1969).
  20. Savov, J. D., et al. Ozone-induced acute pulmonary injury in inbred mouse strains. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 31 (1), 69-77 (2004).

Play Video

Cite This Article
Zhou, D., Zhang, G., Zhao, Q., Cheng, M., Lu, J., Wang, Y., Xu, Y., Chen, Y., Yang, Y., Yin, L. Acupuncture in a Rat Model of Asthma. J. Vis. Exp. (162), e61762, doi:10.3791/61762 (2020).

View Video