Мы представляем протокол ЭКГ, который технически прост, недорог, быстр и доступен для маленьких мышей и может выполняться с повышенной чувствительностью. Мы предлагаем этот метод в качестве скринингового подхода для изучения фармакологических агентов, генетических модификаций и моделей заболеваний у мышей.
Электрокардиограмма является ценным инструментом для оценки системы проводимости сердца. Исследования на животных помогли получить новую генетическую и фармакологическую информацию об электрокардиограмме. Тем не менее, сделать измерения электрокардиограммы у мелких животных in vivo, таких как мыши, было сложной задачей. С этой целью мы использовали метод записи электрокардиограммы у обезболивания мышей со многими преимуществами: это технически простая процедура, недорогая, имеет короткое время измерения и доступна даже у молодых мышей. Несмотря на ограничения с использованием анестезии, сравнение между контрольными и экспериментальными группами может быть выполнено с повышенной чувствительностью. Мы лечили мышей с агонистами и антагонистами вегетативной нервной системы, чтобы определить достоверность этого протокола и сравнили наши результаты с предыдущими отчетами. Наш экГ-протокол обнаружил повышенные частота сердечных сокращений и интервалы на лечение атропином, снижение частота сердечных сокращений и интервалы к ТК после лечения карбабола, а также более высокие частота сердечных сокращений и интервалы с изопреналином, но не заметили никаких изменений в параметрах ЭКГ при администрировании пропранолола. Эти результаты подтверждаются предыдущими отчетами, подтверждающими надежность этого протокола ЭКГ. Таким образом, этот метод может быть использован в качестве скринингового подхода к проведению измерений ЭКГ, которые в противном случае не были бы предприняты из-за высокой стоимости и технических трудностей.
Электрокардиограмма (ЭКГ), тест, который измеряет электрическую активность своего сердцебиения, является ценным инструментом для оценки системы сердечной проводимости. Параметры, измеряемые ЭКГ, включают частоту сердечных сокращений, интервал PR, продолжительность ЗРС и интервал ЗТ. Короче говоря, PR интервал соответствует времени, которое требуется для электрического импульса для перемещения из предсердного синусового узла через атриовентрикулярный узел к волокнам Purkinje; Продолжительность ЗР – это время для деполяризации желудочков через систему Пуркинье и желудочковый миокард; и интервалом ЗТ является продолжительность ретрикулярной репаларизации.
Записи ЭКГ на мышах помогли исследователям изучить сердечную функцию и определить физиологические и патофизиологические механизмы сердечных фенотипов, таких как аритмия, мерцательная аритмия и сердечная недостаточность. Большинство сердечно-сосудистых исследований включает в себя исследования в генетически модифицированных моделях мыши. Часто бывает сложно получить значимые данные о записях ЭКГ от маленьких мышей, которыми генетически манипулировали.
Существует несколько методов для выполнения ЭКГ у мышей1. Исследования показывают, что записи ЭКГ у сознательных животных предпочтительнее, чем обезболивающие животные, когда это возможно, так как влияние анестезии на сердечную функцию были хорошо установлены2. Два протокола, которые записывают ЭКГ в сознательных мышей, имеют примечание1. Система радиотелеметрии ЭКГ является золотым стандартом для непрерывного долгосрочного мониторинга ЭКГ у сознательных мышей1,3. Несмотря на свою силу в записи в сознательном состоянии, радиотелеметрии связаны ЭКГ измерений имеют ряд ограничений, в том числе высокие расходы на установку и для имплантата, его требование к опытным оператором, период стабилизации более 1 недели, его потребность в больших мышей ()gt; 20 г), и приобретение только одного свинца ЭКГ записи1. Другая система, которая использует лапы размера проводящих электродов встроенных в платформу позволяет ЭКГ записи в сознательных мышей без анестезии или имплантатов1,4. Эта неинвазивная система является альтернативным методом в ситуациях, в которых радиотелеметрические системы недоступны, поскольку она имеет много преимуществ: отсутствие требования хирургического лечения, отсутствие необходимости анестезии, низкая стоимость на мышь (только начальная установка стоит дорого), короткое время для измерения, и доступность новорожденных1,4. Основным недостатком этой системы является то, что она не подходит для непрерывного долгосрочного мониторинга1.
Здесь мы вводим еще один недорогой, простой и быстрый метод записи ЭКГ у обезбольных мышей и демонстрируем его достоверность и чувствительность, выполняя ЭКГ после вегетативной блокады/стимуляции системы сердечной проводимости. Мы предлагаем этот метод ЭКГ для скрининга эффектов фармакологических агентов, генетических модификаций и моделей болезней у мышей.
В протоколе есть несколько важных этапов. Окружающая среда должна быть свободна от шума и вибрации. ЭЛЕКТРОДы ЭКГ должны быть вставлены под кожу стабильно и последовательно, из которых шаг вставки требует предварительных экспериментов, пока исследователь технически опытный. Кроме тог…
The authors have nothing to disclose.
Эта работа была поддержана программами фундаментальных научно-исследовательских программ, которые находятся в ведении Национального исследовательского фонда Кореи (NRF) (2015R1C1AA2A0101052419 и 2018R1D1A1B07042484).
2,2,2-tribromoethanol | Sigma-Aldrich | T48402-25G | anesthetics, Avertin |
Animal | Japan SLC, Inc., Shizuoka, Japan | Balb/c mice, male, aged 7-9 weeks | |
Atropine | Sigma-Aldrich | A0123 | parasympathetic antagonist |
BioAmp | AD Instruments, Bella Vista, Australia | ML132 | bio amplifier |
Carbachol | Sigma-Aldrich | C4382 | parasympathetic agonist |
Electrodes with acupuncture needles | DongBang Acupuncture Inc., Sungnam, Korea | DB106 | 0.20 x 15 mm |
Isoprenaline | Sigma-Aldrich | I2760 | sympathetic agonist |
LabChart 8 | AD Instruments, Bella Vista, Australia | data analysis software | |
Mouse food | LabDiet, St. Louis, MO, USA | 5L79 | Mouse diet |
PowerLab 2/28 | AD Instruments, Bella Vista, Australia | data acquisition system | |
Propranolol | Sigma-Aldrich | P0884 | sympathetic antagonist |
SPSS Statistics program | SPSS | SPSS 25.0 | statistics program |