Взаимодействующий белок W10 (ЗВИНТ) участвует в митотической шпиндельной контрольно-пропускной пункт и патогенезе карциномы. Здесь мы вводим методологию иммуностоинга зВИНТ в тканях рака легких человека, а затем цифровое сканирование целых слайдов и анализ изображений. Эта методология может обеспечить высокое качество цифровых изображений и надежные результаты.
Целью данного исследования является внедрение методологии иммуностоинга тканей легких человека, за которой следует цифровое сканирование и анализ изображений. Цифровое сканирование — это быстрый способ сканировать стопку слайдов и создавать цифровые изображения с высоким качеством. Он может производить соответствующие результаты с помощью обычной световой микроскопии (CLM) патологоанатомами. Кроме того, наличие цифровых изображений позволяет позволить одним и тем же слайдам одновременно наблюдаться несколькими людьми. Кроме того, цифровые изображения слайдов могут храниться в базе данных, что означает, что можно избежать длительного износа стеклянных слайдов. Ограничения этого метода таковы. Во-первых, она нуждается в высококачественной подготовленной ткани и оригинальных слайдах иммуногистохимии (IHC) без каких-либо повреждений или избыточного остатка герметика. Во-вторых, опухолевые или неопухолевые области должны быть указаны опытными патологоанатомами перед анализом с помощью программного обеспечения, чтобы избежать путаницы о опухоли или неопухолевых областях во время скоринга. В-третьих, оператор должен контролировать воспроизведение цвета на протяжении всего процесса оцифровки в визуализации с целью сканирования.
Взаимодействующий белок W10 (ЗВИНТ) является необходимым компонентом кинетохорного комплекса, который участвует в митотической шпиндельной контрольно-пропускной пункте1,2,3. Сообщалось, что истощение ЗВИНТ приводит к аномальной преждевременнойхромосомной сегрегации 1,2,3. Недавние исследования показали, что ЗВИНТ участвует в патогенезе множественных опухолей, способствуя пролиферации опухолевых клеток4,5. Ранее мы сообщали о переэкспрессии зВИНТ при раке легких5. Общепризнано, что анализ слайдов патологоанатомов с использованиемCLM занимает много времени, а не количественный 6,7,8. Кроме того, износ хранимых стеклянных слайдов может сделать невозможным втягивание ранее созданных слайдов. Новый метод компьютерной, цифровой визуализации цельного слайда (WSI) может преодолеть эти ограничения6,7,8.
С этой целью мы описываем методологию иммуностоинга зВИНТ в тканях рака легких человека в сочетании с цифровым сканированием и программным анализом изображений. Основным преимуществом этой методики является производство соответствующих результатов с CLM. Эта технология может быть широко использована в области патологического скоринга гематоксилин-эозина окрашивания (H и E) и IHC, флуоресценция на месте гибридизации (FISH), ткани microarrays (TMA), и открытие и развитие наркотиков.
Сканирование цельного слайда становится горячей темой для его надежного сканирования и производства высококачественных изображений для клинических и исследовательских целей11,12,13. Изображения могут быть получены с помощью слайд-ска?…
The authors have nothing to disclose.
Этот проект был поддержан Национальным природным фондом Китая (No 81500151, 81400121, 81270607, 81541027 и 81501352) и Природным фондом провинции Хубэй (Китай) (No 2017CFB631). Авторы выражают свою признательность Го Цинь, Чан Мин, Ли Хуэй, и их коллеги в Wuhan Google биологических технологий Co., LTD за их техническую поддержку. Авторы также благодарят Мухаммада Джамаля за редактирование языка.
Pannoramic MIDI | 3D HISTECH | Cat: PMIDI-040709 | An automated digital slide scanner with a remarkable feature set :12-slide capacity, fluorescence scanning, and many more. |
QuantCenter | 3D HISTECH | Downloaded from the official website of the company | The framework for 3DHISTCH's image analysis applications. |
LEICA RM2235 | Leica Microsystems | Cat: 14050038604 | The enhanced precision of the new accessories will add convenience to block to knife approach as well as specimen orientation. |
Rabbit anti-human Anti-ZWINT antibody | Abcam | Cat: ab197794 | Immunohistochemical analysis of ZWINT in human lung tissue. |
Anti-rabbit secondary antibody | Wuhan Goodbio Technology | Cat:GB23303-1 | Secondary antibody for IHC staining. |
Phosphate-buffered saline | Wuhan Goodbio Technology | Cat:G0002 | A solution containing a phosphate buffer. |
OLYMPUS CX23 | OLYMPUS | Cat:6M87620 | Microscope for detection of H&E or IHC slides. |
Dimethylbenzene | Shanghai Lingfeng Chemical Reagent | Cat:1330-20-7 | A colorless, flammable fluid used as a solvent and clarifying agent in the preparation of tissue sections for microscopic study. |
Hematoxylin Staining Solution | Wuhan Servicebio technology | Cat:G1039 | It is commonly used for histologic studies, oftern colors the nuclei of cells blue. |
Tween 20 | Baitg | Cat:2005-64-5 | It is a polysorbate-type nonionic surfactant formed by the ethoxylation of sorbitan before the addition of lauric acid. It is used as a deterent and emulsifier in pharmacological applications. |
Citric acid repair liquid | Wuhan Servicebio technology | Cat:G1202 | Is is used to repair antigen after fixation during IHC procedure. |
LEICA ASP200s | Leica | Cat: 14048043626 | It was designed for routine and research histopathology of up to 200 cassettes. |
LEICA Arcadia H | Leica | Cat: 14039354103 | It is a heated paraffin embedding station and allows for simple operation and precise control, resulting in improved quality, a smooth workflow and reliability. |
LEICA Arcadia C | Leica | Cat: 14039354102 | It is a cold plate holding more than 60/65 cassettes on its large working surface. It was designed with an environment adaptive control module to make sure the operating temperature is always stabilized at -6°C. |
CaseViewer Software | 3DHISTECH |