알코올 중독에 대 한 Pharmacotherapies의 개발 모델을 마시는 murine: 어둡고 2 병 선택에 마시는
Summary
알코올 사용 장애 (AUD) 주요 국가 건강 문제가 고 더 효과적인 치료법의 개발이 환자 인구의 요구를 오프셋 하는 데 필요한. 이 위해 다음 프로토콜 리드 안티 알코올 화합물의 임상 효능을 평가 하기 위해 두 가지 간단한 설치류 마시는 모델을 활용 합니다.
Abstract
알코올 사용 장애 (AUD)와 주요 문제는 보다 더 약된 76 백만 사람들 전세계 진단 기준에 부합. 현재의 치료는 크게 효과가 정신 결합 하는 경우에 개입, 높은에 의해 분명 것으로 재발 율 3 FDA 승인 약품에 제한 됩니다. 따라서, 더 새로운 치료에 대 한 검색 중요 한 공중 보건 목표를 나타냅니다. 이 위해 다음 프로토콜 리드 안티 알코올 화합물의 임상 효능을 평가 하기 위해 두 가지 간단한 설치류 마시는 모델 활용: 2 병 선택 (TBC)과 어둠 (DID)에 마시는. 전 적당히 자발적인에 쥐를 유도 하는 동안 자발적인 음료를 쥐 술자리를 모방 하는 짧은 기간에 많은 양의 알코올 소비 수 있습니다. 이러한 패러다임의 둘 다의 간단 하 고 높은 처리량 특성 약리 에이전트의 신속한 심사에 대 한 또는 식별 특정 자발적인 마시는 행동 하는 쥐의 긴장에 대 한 허용.
Introduction
지난 25 년 동안, 플러스 상당한 노력 알코올 사용 장애 (AUD)1의 치료를 위해 약물을 개발 하는 쪽으로 넣어 왔다. 비록 많은 발전 한 AUD 여전히 남아 중요 한 공중 위생 문제 이상의 18 백만 미국인에 영향을 미치는 220 십억 달러 이상 비용이 매년2,3. 현재 3 FDA 승인 약품, disulfiram, naltrexone, 그리고 acamprosate, 임상 시험 및 한정 된 성공 조차 병원 설정에서 사회 심리적인 내정간섭과 결합 될 때 일관성 없는 결과 굴복 했다 모두는 있다 4 , 5 , 6 , 7.
현재 AUD 치료의 실패에 대 한 주요 이유는 AUD8의 이기종 특성에 연결 된다. 환경 및 유전적 요인 AUD의 발전에 기여, 동안 상속 가능성 발병9의 위험의 약된 50-60%를 차지 한다. 우울증의 치료와 마찬가지로, 그것은 널리 허용 AUD 고통 받아 환자 환자 각10의 요구에 맞게 맞춤형 약물의 다양 한 필요 합니다.
명확 하 게, 보다 효과적인 치료 약물 발견의 이미 힘든 시간이 걸리는 과정 간소화3경우 촉진 될 것 이라고 위한 긴급 한 필요가 있다. 이 위해 다음 프로토콜 두 설치류 마시는 모델 널리 AUD11의 neurobiological 기초를 검사 하는 데 사용의 임상 적용을 보여줍니다. 여기 소개 하는 방법 알콜을 감소에서 후보 화합물의 효능을 평가할 수 있습니다 좀 더 구체적으로, “중간”와 “마시는 파티” 시나리오 2 병 선택 (TBC)을 활용 하 고 어두운 (DID) 패러다임에서 마시는 소비 각각. 두 패러다임 검사 비 조작 에탄올 자기 관리, 그것에 의하여 쥐 구두로 고 지에서 에탄올을 섭취 및 따라서 높은 얼굴을 설명 및 유효 인간의 알코올 중독11의 모델을 구성 합니다.
TBC 음주, 일컬어 자유 선택 음주, 음주, 환경 설정 또는 사회적 음주, 솔루션의 두 병 홈 장에 지속적으로 사용할 수 있습니다. 한 병 들어 물, 그리고 에탄올, 에탄올의 농도 변화 될 수 있다 그것에 의하여의 희석된 솔루션을 포함 (예., 5-30 %v / v)11,12. 쥐 두 병 계속 액세스할 수 있고 따라서 얼마나 마시는 각 병에서 선택할 수 있습니다.
이 모델은 에탄올 선호 비율 (에탄올 소비 ÷ 총 볼륨 액체 소모의 볼륨) 뿐만 아니라 각 마우스 (g/kg)의 에탄올 소비를 평가 합니다. 그것은 정기적으로 또는 특정 유전자 조작 후 쥐의 다른 긴장에서 음주 레벨을 비교 하는 (예., 유전자 녹아웃 또는 최저) 및 혈액 에탄올 농도 (BECs) 인간에서 무엇을 발견 비슷한 결과 때 적당히13,14에서 음주.
DID 절차, 어두운 주기의 시작 후 3 h 물 홈 케이지 병 마시는 세션 제한 된 액세스에 대 한 20% (v/v) 에탄올 솔루션의 병으로 교환 됩니다. 마시는 세션 하루에 4 연속 4 일 주기, 1-3 일 지속 2 h 4 h로 발생합니다. 일 1-3 주 4에 테스트 하기 전에 알코올 요법이 니 기간 역할을 합니다. 따라서, 마우스 안정적으로 BECs 달성 하기 위해 충분 한 에탄올 소비 > 100 mg/dL와 그 결과,13,,1415마시는 binge는 인간에서 발견 하는 중독의 행동 효과 전시. 물 접근은 항상 마시는 세션 이외에 사용할 수 있습니다.
제한 된 액세스 술의 몇몇 변이가 있다. 예를 들어 간헐적으로 액세스 모델에서 마우스 받을 두 병 (1 개의 포함 물과 다른 포함 20% (v/v) 에탄올) 월요일, 수요일, 그리고 금요일에만 평일 및 주말, 각각1624 시간 및 48 h 철수 기간. 간헐적인 액세스의 몇 주 후 쥐 조금씩 하 고 자발적으로 결국 달성 BECS 무엇 DID 모델에서 관찰은 비슷한 수준의 음주를 확대 시킨다. 그러나 DID,, 파티 같은 마시는 행동을 평가 하기 위해 가장 일반적으로 사용 모델에 나타납니다. 간헐적으로 마시는 다른 모델 존재 하지만 그들은 음식에 대 한 액세스를 제한에 의존 하거나 증기 챔버 유발 증가 그들에 게 자발적인 인간의 알코올 소비16의 더 적은 대표를 시키는 자발적인 자기 관리.
Protocol
Representative Results
Discussion
전세계 추정으로 76 백만 명 영장 진단 알코올 사용 장애 (AUD)에 대 한 기준을 충족 나타냅니다. 불행히도, 현재 사용할 수 있는 제약 치료는 크게 효과적 이며 추가 개발이 임상 인구20의 요구를 오프셋 하는 데 필요한. 이 위해 다음 두 패러다임을 마시는 가장 기본적인 설치류의 예증으로이 노력을 촉진을 목표로 프로토콜: 2 병 선택 (TBC)과 어둠 (DID)에 마시는. 두 모델 모두 에탄?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작업을 지원 했다, 부분적으로, 연구에 의해 부여 SC CTSI NIH/NCRR/NCATS-UL1TR000130 (D.L.D.), AA022448 (D.L.D.), 그리고 약국의 USC 학교.
Materials
| 1 L graduated cylinder | VWR | https://us.vwr.com/store/product/20935285/marisco-single-scale-cylinder-graduates-john-m-maris-co | To prepare ethanol solution. |
| 1 L glass bottle | Pyrex (Fisher Scientific) | https://www.fishersci.com/shop/products/pyrex-reusable-media-storage-bottles-12/p-42752 | To prepare ethanol solution. |
| 100 mL graduated cylinder | Fisher Scientific | https://www.fishersci.com/shop/products/kimble-chase-kimax-class-a-to-contain-graduated-cylinders-8/p-4369311 | To prepare ethanol solution. |
| Analox | One potential method of analyzing DID blood samples is by using the analox machine | ||
| ball-bearing sipper tubes | Ancare Corp. | http://www.ancare.com/products/watering-equipment/open-drinking-tubes/straight-tubes-ball-point | Length: 2.5 inches, Diameter: 5/16 inches, Model: TD100 |
| C57BL/6J Mice | Jackson lab | https://www.jax.org/strain/000664 | May also come from internal breeding colony |
| disposable serological pipets | VWR International (VWR) | https://us.vwr.com/store/product/4760455/vwr-disposable-serological-pipets-polystyrene-sterile-plugged | 10 mL, 18 mL, or 25 mL |
| ethanol, pure, 190 proof (95%), USP, KOPTEC | Decon Labs (VWR) | https://us.vwr.com/store/product/4542412/ethanol-pure-190-proof-95-usp-koptec | — |
| heat gun | Master Appliances Corp. | http://www.masterappliance.com/master-heat-guns-kits/ | |
| heat shrink tubing | — | — | Diameter: 3/8 inches |
| industrial knife/blade | — | — | — |
| metal cage plate | — | — | Should be available through the university/institutional vivarium |
| mouse RO water | — | — | Should be available through the university/institutional vivarium |
| portable electronic scale | Ohaus (VWR) | https://us.vwr.com/store/product/4789377/portable-electronic-cs-series-scales-ohaus | — |
| red light headlamp | nyteBright (Amazon) | https://www.amazon.com/LED-Headlamp-Flashlight-Red-Light/dp/B00R0LMMF8/ref=sr_1_1?ie=UTF8&qid=1499591137&sr=8-1-spons&keywords=red+lamp+headlamp&psc=1 | — |
| silicone stoppers | Fisher | — | — |
| thermometer | Fisher Scientific | https://www.fishersci.com/shop/products/fisher-scientific-hygro-thermometer-clock-large-display-2/p-4077232 | — |
| weigh boat | VWR International (VWR) | https://us.vwr.com/store/product/16773534/vwr-pour-boat-weighing-dishes | The lid from a pipete tip box is an appropriate alternative |
References
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