Summary

Effecten van blootstelling van Formaldehyde aan een Rat Model van atopische Dermatitis veroorzaakt door neonatale capsaïcine behandeling

Published: September 27, 2017
doi:

Summary

We beschrijven hier methoden voor de behandeling van neonatale capsaïcine ertoe atopische dermatitis bij ratten en blootstelling van gevaporiseerde formaldehyde te onderzoeken van de effecten van formaldehyde inhalatie op atopische dermatitis.

Abstract

Atopische dermatitis is chronisch relapsing pruritic eczeem en heerst over de hele wereld vooral in ontwikkelde landen. Complexe interacties tussen genetische en omgevingsfactoren is bekend dat een belangrijke rol spelen in de pathofysiologie van atopische dermatitis. Echter wij nog steeds een gebrek aan een gedetailleerd beeld van de pathogenese van de ziekte. Het is dus van belang voor het ontwikkelen van passende dierlijke modellen voor het ophelderen van de progressie van atopische dermatitis. Bovendien breidt het onderzoeken van het effect van milieufactoren zoals luchtverontreiniging op atopische dermatitis begrip van de ziekte. Hier beschrijven we een methode voor het inducerende atopische dermatitis bij ratten met neonatale capsaïcine behandeling en een protocol voor Gasbedwelming met behulp van een constante concentratie van formaldehyde ratten te onthullen van de effecten op de ontwikkeling van atopische dermatitis in infantiele en adolescent perioden. Deze protocollen zijn met succes toegepast op verschillende experimenten en kunnen worden gebruikt voor andere stoffen.

Introduction

Om de effecten van formaldehyde (FA) inademing op atopische dermatitis (AD) progressie te ondervragen, we een protocol voor AD inductie opgericht en ontwikkeld van een conventionele omloop kamer voor chronische blootstelling voor FA.

AD is een chronische inflammatoire huidziekte toegeschreven aan de complexe interacties tussen genetische aanleg en milieu triggers1,2. Een goede diermodel is vereist voor het bestuderen van AD in de preklinische staat. Dit is het belangrijkste bij het ophelderen van de pathogenese van AD onder invloed van de omgevingsfactoren. Bovendien, om te beter onderzoeken de effecten van het milieu triggers op de progressie van de advertentie, het is essentieel te scheiden van de individuele milieufactoren en kwantificeren van de mate van blootstelling.

We hebben een nieuwe rat model van AD geïnduceerd door neonatale capsaïcine behandeling aangetoond. Deze advertentie model3 heeft sommige verdiensten ten opzichte van andere AD-modellen zoals de modellen van de AD geïnduceerd door overgevoeligheid van de epicutaneous, de genetisch gemanipuleerde AD-modellen en de spontane Muismodellen van AD4. Eerst, ontwikkelt dit model AD-achtige symptomen op de leeftijd van 3 weken, die correspondeert met baby AD en ouder is dan andere spontane Muismodellen van advertentie zoals de NC/Nga muis. In sommige gevallen, in tegenstelling tot de genetisch gemanipuleerde AD modellen, de symptomen van de AD-modellen verdwijnen en terugvalpreventie spontaan over een periode van 20 weken. Bovendien, het proces van de inductie van AD-achtige symptomen in het model is eenvoudiger dan die van het epicutaneous sensibilisatie model, dat meer vergelijkbaar met de allergische contactdermatitis in het perspectief van de inductie-proces is.

Met behulp van een acryl glas-kamer en een conventionele medische zuurstof regelgever5 aan het bestuderen van de effecten van FA inhalatie betreffendedeontwikkeling van AD in infantiele en adolescent periodes hebben we het nieuwe protocol voor FA blootstelling aan een dierlijk model geïntroduceerd. De regelgever heeft konden we bloot van de dieren een constante concentratie van het gas door het aanpassen van het debiet en de concentratie van de oplossing. Eerdere studies hebben verschillende manieren van blootstelling van FA aan diermodellen gemeld. Xu et al. beschreven de methode van de blootstelling in welke FA oplossing voor het rechtstreeks op de huid6is toegepast. Een andere recente studie gericht het protocol van FA gas blootstelling met behulp van een gespecialiseerde vluchtige oplosmiddelen generator, model 49127. Vergeleken met de methoden van eerdere studies, de nieuwe methode gemakkelijker is uitgerust en kan worden toegepast voor andere oplossingen naast FA.

Protocol

alle methoden die hier worden beschreven zijn goedgekeurd door de internationale Animal Care en gebruik Comité (IACUC) van Korea University College van geneeskunde. van 6 weken na de geboorte, experimenteurs kunnen induceren enthansasia en verzamelen verschillende monsters zoals de huid en serum van ratten. 1. inductie van advertentie door neonatale capsaïcine behandeling toevoegen om te bereiden 5 mg/mL capsaïcine oplossing, 50 mg capsaïcine tot 1 mL Tween 80 en 100% ethanol i…

Representative Results

De AD-achtige huidontsteking van de capsaïcine behandeld AD rat model op 7 weken van leeftijd wordt gepresenteerd in figuur 1A. Robuuste krassen gedrag van het model AD-rat capsaïcine behandeld wordt weergegeven in de Video 1. Neonatale capsaïcine behandeling ontlokte dermatitis en verergerd krabben gedrag bij ratten 3 weken oud, en AD-achtige symptomen duurt al enkele weken (figuur 1B, C). Ho…

Discussion

Het protocol hier beschreven voor de inductie van AD-achtige symptomen bij ratten kan worden aangepast voor het bestuderen van AD pathofysiologie en gebruikt als een instrument voor screening voor drugtest. Het instrument voor de blootstelling van gasvormige FA aan capsaïcine behandelde ratten kan worden toegepast om de effecten van blootstelling aan verschillende gassen op verschillende diermodellen.

De neonatale capsaïcine behandeld advertentie model is gebaseerd op een meer eenvoudige pro…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Dit onderzoek werd gesteund door het openbare welzijn & onderzoek veiligheidsprogramma via de nationale onderzoek Stichting van Korea (NRF) gefinancierd door het ministerie van onderwijs, wetenschap en technologie (NRF-2014M3C8A5030612), en ondersteund door de Chung Yang, Cha Young Zon, M.D. en Jang Hallo Joo Yeu Sa Memorial Fund.

Materials

Medical Oxygen Regulator Yuyao Jiahua Medical manufacturer will not affect results
Tube manufacturer will not affect results
Acrylic Chamber Taejin Acryl manufacturer will not affect results
Plastic Chamber Taejin Acryl manufacturer will not affect results
Paraformaldehyde, powder Sigma 158127 manufacturer will not affect results
Wrap filme Uniwrap manufacturer will not affect results
Capsaicin Sigma M2028 manufacturer will not affect results
Tween80 Sigma P4780 manufacturer will not affect results
Digital Video Camera Sony HDR-CX380y manufacturer will not affect results
Isoflurane JW pharmaceutical manufacturer will not affect results

References

  1. Geha, R. S. Allergy and hypersensitivity. Nature versus nurture in allergy and hypersensitivity. Curr Opin Immunol. 15 (6), 603-608 (2003).
  2. Novak, N., Bieber, T., Leung, D. Y. Immune mechanisms leading to atopic dermatitis. The J Allergy Clin Immunol. 112 (Suppl 6), S128-S139 (2003).
  3. Back, S. K., et al. Chronically relapsing pruritic dermatitis in the rats treated as neonate with capsaicin; a potential rat model of human atopic dermatitis. J Dermatol Sci. 67 (2), 111-119 (2012).
  4. Jin, H., He, R., Oyoshi, M., Geha, R. S. Animal models of atopic dermatitis. J Invest Dermatol. 129 (1), 31-40 (2009).
  5. Han, R. T., et al. Formaldehyde-Induced Aggravation of Pruritus and Dermatitis Is Associated with the Elevated Expression of Th1 Cytokines in a Rat Model of Atopic Dermatitis. PLOS ONE. 11 (12), e0168466 (2016).
  6. Xu, B., Aoyama, K., Takeuchi, M., Matsushita, T., Takeuchi, T. Expression of cytokine mRNAs in mice cutaneously exposed to formaldehyde. Immunol Lett. 84 (1), 49-55 (2002).
  7. Kim, J. Y., Jeong, M. S., Park, K. Y., Seo, S. J. Aggravation of atopic dermatitis-like symptoms by consecutive low concentration of formaldehyde exposure in NC/Nga mice. Exp Dermatol. 22 (3), 219-221 (2013).
  8. Laske, N., Niggemann, B. Does the severity of atopic dermatitis correlate with serum IgE levels?. Pediatr Allergy Immunol. 15 (1), 86-88 (2004).
  9. Fujii, Y., Takeuchi, H., Sakuma, S., Sengoku, T., Takakura, S. Characterization of a 2,4-dinitrochlorobenzene-induced chronic dermatitis model in rats. Skin Pharmacol Physiol. 22 (5), 240-247 (2009).
  10. Sugimoto, T., Xiao, C., Ichikawa, H. Neonatal primary neuronal death induced by capsaicin and axotomy involves an apoptotic mechanism. Brain Res. 807 (1-2), 147-154 (1998).
  11. Saito, A., et al. Characterization of skin inflammation induced by repeated exposure of toluene, xylene, and formaldehyde in mice. Environ Toxicol. 26 (3), 224-232 (2011).
  12. Jung, W. W., et al. Formaldehyde exposure induces airway inflammation by increasing eosinophil infiltrations through the regulation of reactive oxygen species production. Environ Toixcol Pharmacol. 24 (2), 174-182 (2007).

Play Video

Cite This Article
Han, R. T., Back, S. K., Lee, J., Kim, H. y., Kim, H. J., Na, H. S. Effects of Exposure of Formaldehyde to a Rat Model of Atopic Dermatitis Induced by Neonatal Capsaicin Treatment. J. Vis. Exp. (127), e55987, doi:10.3791/55987 (2017).

View Video