Стволовые клетки являются перспективными терапевтическими носителями для лечения опухолей головного мозга из-за их внутреннего опухолевого тропизма. Неинвазивная интраназальная доставка стволовых клеток обходит гематоэнцефалический барьер и демонстрирует сильный потенциал для клинического перевода. В этой статье обобщены основные принципы доставки интраназальных стволовых клеток в мышиную модель глиомы.
Внутренний тропизм к злокачественным новообразованиям мозга делает стволовые клетки перспективными носителями терапевтических агентов против злокачественных опухолей. Доставка терапевтических стволовых клеток по интраназальному маршруту – это недавно открытая альтернативная стратегия с сильным потенциалом для клинического перевода из-за ее неинвазивного характера по сравнению с внутричерепной имплантацией или доставкой по системным маршрутам. Отсутствие гематоэнцефалического барьера еще более усиливает терапевтический потенциал стволовых клеток, подвергающихся интраназальному вхождению мозга. В этой статье обобщаются основные методы, используемые в наших исследованиях, и излагаются основные принципы интраназальной стратегии доставки стволовых клеток с использованием мышиной модели внутричерепных ксенотрансплантатов глиомы. Мы демонстрируем оптимизированные процедуры, которые генерируют согласованные и воспроизводимые результаты с определенными заранее определенными экспериментальными параметрами и предлагают рекомендации для упрощенного рабочего потока, которые обеспечивают эффективное выполнение и надежный опытКонечный результат. Статья призвана служить базой для дальнейшей экспериментальной настройки на основе гипотезы, типов стволовых клеток или особенностей опухоли.
Низкая токсичность, низкая иммуногенность и внутренний потоотдел опухоли мозга стволовых клеток человека являются привлекательными чертами для доставки терапевтических средств 1 . Новые терапевтические средства на основе стволовых клеток для злокачественных опухолей головного мозга являются перспективными нововведениями, разработанными в последние годы, а интраназальная адаптация этой терапевтической стратегии представляет собой скачок к клиническому переводу, поскольку неинвазивное и повторное введение может значительно снизить барьер для приложений пациентов и Могут быть адаптированы для амбулаторных услуг без общей анестезии или длительной стационарной службы, связанной с инвазивными хирургическими процедурами 1 , 2 , 3 , 4 .
Мы и другие стали инициаторами интраназального пути доставки стволовых клеток к опухолям головного мозга и заложили основы для некоторых основных принциповТрансляционных исследований с использованием моделей 2 , 3 , 4 мышиного ксенотрансплантата, а также исследовали миграцию стволовых клеток in vivo с помощью реагентов реагентов магнитно-резонансной томографии (MRI) 2 . Благодаря этим экспериментальным исследованиям мы накопили значительный опыт и получили представление о том, как наилучшим образом построить надежную стратегию доклинической оценки с использованием хорошо известных моделей мышиных ксенотрансплантатов (PDX) злокачественной глиомы, сохраняя при этом разрешение на исследование для изучения Тонкие механические детали сложных биологических явлений интраназального ввода мозга терапевтических стволовых клеток, доставляемых в полость носа. Здесь мы описываем принципы стандартизованного рабочего протокола для демонстрации текущего состояния экспериментальных исследований с использованием хорошо налаженной линии нервных стволовых клеток человека HB1.F3.CD 5 <sup>, 6 , 7 , 8 , который легко модифицируется для адаптации к конкретным опухолевым моделям или стратегиям с использованием человеческих стволовых клеток в качестве терапевтических носителей.
Хотя интраназальный путь доставки лекарств широко изучен для небольших молекул, наномедицинов и белковых соединений 18 , применение терапевтических стволовых клеток для нацеливания опухолей внутрипозвоночного мозга является очень новым в спектре терапевтических опухол…
The authors have nothing to disclose.
Эта работа была поддержана NIH R01NS087990 (MSL, IVB).
Stereotaxic frame | Kopf Instruments | Model 900 | |
Hypoxic Cell Culture Incubator | ThermoFisher Scientific | VIOS 160i | |
Cell culture supplies (Plastics) | ThermoFisher Scientific | Varies | Replaceable with any source |
Legend Micro 21R Refrigerated Microcentrifuge | ThermoFisher Scientific | 75002490 | Replaceable with any source |
Bench centrifuge Sorvall ST16R | ThermoFisher Scientific | 75004240 | Replaceable with any source |
Micro syringe 702N 25µl (22S/2"/2) | Hamilton Company | 80400 | Flat tip |
Sample Tray for Irradiator | Best Theratronics | A13826 | To set up mice protection with lead shield |
Leica DMi8 Microscope | Leica Microsystem | Custom setup | |
Leica CM1860 UV cryostat | Leica Microsystem | Custom setup | |
Exel International Insulin Syringe | ThermoFisher Scientific | 14-841-31 | |
Corning Phosphate Buffer Saline | Corning Cellgro/ThermoFisher | 21-031-CV | |
Dulbecco's Modified Eagle Medium | Corning Cellgro/ThermoFisher | 11965-084 | |
Trypsin 0.05% | Corning Cellgro/ThermoFisher | 25300054 | |
Hyaluronidase from bovine testes | MilliporeSigma | H3506 |