Summary

マウス全層皮膚移植

Published: January 02, 2017
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Summary

マウス全層皮膚移植は同種免疫設定で拒絶反応を研究するために、十分に確立されたモデルです。 > C57BL / 6全層皮膚移植 – ここでは、BALB / cと実行に関与し、各ステップのチュートリアルを提供しています。

Abstract

マウスの全層皮膚移植は、同種免疫反応および移植片拒絶を研究するためのインビボモデル十分に確立されています。ヒトへのその限られた用途にもかかわらず、マウスでは皮膚移植が広く移植研究のために採用されています。手順は、学び、実行することが容易であり、それは繊細な顕微技術も広範囲の訓練を必要としません。また、このモデルにおける移植片拒絶は、非常に再現性の免疫反応で発生しやすい直接検査や触診によって監視されます。また、ドナーをマッチさせた、またはサードパーティの皮膚移植片を有する二次皮膚移植はドナー特異的寛容を評価するための代替と合併症のない方法として、より複雑な移植モデル上で実行することができます。合併症は低く、一般的に手順の後、麻酔の過剰摂取や呼吸困難に限定されています。移植の失敗は、他の一方で、GRの準備不足の結果として、一般的に発生します移植床における後方、不正確な位置決め、または包帯の不適切な配置。この記事では、我々は、マウスの全層皮膚移植のためのプロトコルを提示し、成功した手順のために必要な重要な手順を説明します。

Introduction

臓器移植は、末期の臓器不全を有する患者のための選択の治療法である、と結果は外科的手順および免疫抑制プロトコルの進歩と飛躍的に向上しています。しかし、長期的な免疫抑制は、重大な副作用に関連付けられている、と寛容を促進する新たな戦略の開発は、現代の移植研究の目標のままです。

多数の動物モデルが、移植片拒絶反応を予防するため、長期的な耐性1-3を促進するため接近同種移植片拒絶反応のメカニズムを研究するために、および免疫抑制を試験するために、移植における基礎研究のために開発されています。マウスモデルは、原因、診断と治療用抗体の排他的で広大な可用性と明確に定義された近交系およびトランスジェニック株と免疫学研究の主力となっています。皮膚移植は特別な顕微スキルや缶を必要としない簡単な手順であります簡単に術後監視されます。まとめると、マウスの皮膚移植は、移植片拒絶4,5中の抗原送達、細胞輸送、および組織破壊を含む同種免疫応答に関与する多くの側面を研究するための例外的なツールとなっています。

ここでは、マウスモデルを用いた全層皮膚移植のためのステップバイステップの手順を示し、我々は移植皮膚の生着の成功のために必要な重要な手順を説明します。

Protocol

すべての手順は、国立衛生研究所の実験動物の管理と使用に関する指針(NIH)に従って行ったし、ジョンズ・ホプキンス大学動物実験委員会(JHUACUC)によって承認されました。具体的な手順は、承認されたACUCプロトコルMO13M292とMO13M370下で行いました。 1.ドナー皮膚の収穫イソフルラン( – マウスコーンを介して、2%、4%で誘導気化器、1でのメンテナンス)で?…

Representative Results

レシピエントマウスに包帯の配置は、手順の重要なステップです。皮膚移植は、肩、腰、及び背骨( 図1)との間で、受信者の胴体上に配置されます。包帯は、折り畳まれたガーゼと2プラスチック絆創膏の組み合わせで作られています。レシピエントマウスは、包帯の中心にガーゼの上にダウン移植片で配置されています。 2つの湾曲マイクロ鉗子を用い…

Discussion

メダウォアによるその導入されて以来、最初のヒトの研究で、その後、ウサギおよびマウスで、皮膚移植、同種免疫応答6,7の研究のための貴重なモデルとなっています。この原稿では、上下の背中の皮膚を用いた大規模な、非血管新生化、全層皮膚移植のモデルを提示します。移植組織の供給源として、マウスの尾の皮膚又は耳の皮膚を使用することを含む様々な代替方法は、8,9…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

この作品は、NIHの助成金R01AI077610によって賄われていました。

Materials

Straight micro forceps  Sigma F4017
Curved micro forceps  Aesculap BD333R
Curved Stevens tenotomy scissors  Aesculap BC905R
Mayo dissecting  scissors Sigma S3146
Micro needle holder Aesculap BM563R
Sterile gauze Covidien 441218
6-0 Nylon suture  MWI 31849
Plastic Strips Band-Aid Johnson & Johnson Obtained from pharmacy
10 cm Petri dish Fisherbrand FB0875712
PBS Quality Biological 119069131
Buprenorphine DEA Number required; Obtained from hospital pharmacy
Enrofloxacin Bayer Health Care 186599

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Cite This Article
Cheng, C., Lee, C., Fryer, M., Furtmüller, G. J., Oh, B., Powell, J. D., Brandacher, G. Murine Full-thickness Skin Transplantation. J. Vis. Exp. (119), e55105, doi:10.3791/55105 (2017).

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