Summary

Ultraschall Beurteilung der Fluss Mediated Dilation des Brachial und Oberflächliche Femoralarterie in Ratten

Published: November 03, 2016
doi:

Summary

Nicht-invasive Beurteilung der Endothelfunktion bei Menschen kann durch die Strömung-vermittelte Dilatation Technik bestimmt werden. Obwohl Tausende von Studien, die diese Technik verwendet haben, hat keine Studie, die diese Technik nicht-invasiv in Ratten durchgeführt. Der folgende Artikel beschreibt nicht-invasive Messung von Durchfluss-vermittelten Dilatation in brachialis und oberflächlichen Oberschenkelarterien von Ratten.

Abstract

Arterial vasodilation to increases in wall shear rate is indicative of vascular endothelial function. In humans, the non-invasive measurement of endothelial function can be achieved by employing the flow-mediated dilation technique, typically performed in the brachial or superficial femoral artery. Briefly, a blood pressure cuff placed distal to an ultrasound probe is inflated to a suprasystolic pressure, which results in limb ischemia. After 5 min of occlusion the cuff is deflated, resulting in reactive hyperemia and increases in wall shear rate that signal vasodilatory molecules to be released from the endothelium eliciting vasodilation. Despite the thousands of studies performing flow-mediated dilation in humans, surprisingly, no studies have performed this technique non-invasively in living rats. Considering the recent shift in focus to translational research, the establishment of guidelines for non-invasive measurement of flow-mediated dilation in rats and other rodents would be extremely valuable. In the following article, a protocol is presented for the non-invasive measurement of flow-mediated dilation in brachial and superficial femoral arteries of rats, as those sites are most commonly measured in humans.

Introduction

Das vaskuläre Endothel ist eine zelluläre Monoschicht, die Linien, die das Lumen der Arterien und ist ein wichtiger Regulator der Gefäßfunktion. Es gibt zahlreiche Moleküle aus dem Endothel freigesetzt, die in der Modulation von Blutgefäßdurchmesser zur Folge haben. Unter diesen Molekülen wird Stickstoffmonoxid (NO), das primäre vasodilatatorische Molekül aus dem vaskulären Endothel in Antwort auf die Stimulation (zB Insulin, Acetylcholin oder Änderungen der Scherspannung) freigegeben zu 1 liegen . Im vaskulären Endothel, wird NO durch das Enzym endothelialen NO – Synthase (eNOS) hergestellt und wird anschließend von Endothelzellen 2 freigesetzt. NO diffundiert zum glatten Gefäßmuskulatur , wo es Entspannung und erhöhte Gefäßdurchmesser 3 bewirkt.

Endotheliale Dysfunktion kann mit dem flussvermittelte Dilatation (FMD) Technik 4,5 beim Menschen untersucht nicht-invasiv werden. MKS ist eine funktionelle Bioassay für darzustellen vorgeschlagen Endothel-derivedNO Bioverfügbarkeit bei Menschen und wird typischerweise bei brachialis oder A. femoralis superficialis in Reaktion auf reaktive Hyperämie nach einer ~ 5 min Extremität Okklusion 6 beurteilt. Reaktive Hyperämie erhöht Kräfte laminaren Scher , die 7 an die Endothelzellen transduziert, die Signalgebung zu einer Freisetzung von NO 8. Obwohl in den letzten Jahren ist 9,10 der Anteil der Vasodilatation durch NO – Freisetzung eingeleitet diskutiert wurde, ist indikativ für FMD endothelabhängige Dilatation und konsequent wurde 11-13 kardiovaskulärer Ereignisse vorherzusagen gezeigt.

Bis heute haben Tausende von Studien, die die MKS-Technik zur nicht-invasiven Messung der Endothelfunktion beim Menschen eingesetzt. In Anbetracht der jüngsten Verschiebung des Fokus auf translationale Forschung, Richtlinien für die nicht-invasive Messung von Maul- und Klauenseuche bei Nagern wäre äußerst wertvoll sein. Schritt halten mit einem translationalen Ansatz wurde dieses Protokoll für die Messung der Maul- und Klauenseuche in brachial und Supe etabliertrficial Oberschenkelarterien von Ratten, wie diese Websites werden am häufigsten bei Menschen gemessen. Dieses Protokoll führt zu einer robusten und reproduzierbaren MKS Reaktion bei Ratten, aber die Messung der Maul- und Klauenseuche in Ratten ist technisch anspruchsvoll und schwierig sein kann für andere Forscher ohne Video-Demonstration zu replizieren. Daher wird der folgende Artikel ist ein Verfahren zur nicht-invasiven Messung von FMD in brachialis und oberflächliche Oberschenkelarterien von Ratten zeigen.

Protocol

Alle Tierverfahren entsprach dem Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren 14 und wurden von der University of Utah und Salt Lake City Veterans Affairs Medical Center Animal Care und Verwenden genehmigt. 1. Vorbereitung der Tiere Platzieren Tier in Narkose Induktionskammer, die 3% Isofluran in 100% Sauerstoff. Lassen Sie das Tier in der Induktionskammer, bis er nicht mehr reagiert auf äußere Reize ist. Nehmen Sie das Tier aus der Induktionskam…

Representative Results

Flussvermittelte Dilatation wurde auf der brachial durchgeführt und A. femoralis superficialis von 8 Wistar-Ratten. Positionierung einer Ratte wird in Abbildung 1 dargestellt. Representative Ultraschallbilder der Arteria femoralis superficialis sind in Abbildung 2 dargestellt. <img alt="Abbildung 1" src="/files/ftp_upload/54762/5476…

Discussion

In der vorliegenden Studie wurde eine nicht-invasive Messung von Maul- und Klauenseuche in der brachialen und oberflächlichen Oberschenkelarterien von Ratten nachgewiesen. Ähnlich wie beim Menschen 6 nach einer 5 min Okklusion Periode gab es eine rasche Zunahme der Blutgeschwindigkeit (dh reaktive Hyperämie) , wodurch Scherrate an der Arterienwand erhöht wird, was in der nachfolgenden Vasodilatation der Arterie geführt. FMD wurde sowohl in der brachialen und oberflächlichen Oberschenkelarterien beobacht…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

All animal imaging was performed at the Small Animal Imaging Core Facility, University of Utah.

This study was funded in part by grants from the National Institutes of Health (R21 AG043952, R01 AG040297, K01 AG046326, K02 AG045339, and R01 DK100505).

Materials

Vevo 2100 High Resolution Micro-Ultrasound Imaging System VisualSonics, Toronto, ON, CAN
MicroScan Ultra-High Frequency Linear Array Transducer – MS-700 30-70 MHz VisualSonics, Toronto, ON, CAN
Vevo Imaging Station VisualSonics, Toronto, ON, CAN
Thermasonic gel warmer Parker Laboratories, Fairfield, NJ, USA 82-03 Optional
Signacreme electrode cream Parker Laboratories, Fairfield, NJ, USA 17-05
Transpore surgical tape 3M, Maplewood, MN, USA 1527-1
Depilatory cream (e.g., Nair) General supply
Cotton swabs General supply
Ultrasound gel General supply
Standard vascular occluder, 10 mm lumen diameter Harvard Apparatus, Holliston, MA, USA 62-0115
10 ml syringe with Luer-Lok tip General Supply Used for occlusion cuff apparatus
Paperclip General Supply Used for occlusion cuff apparatus
Hypodermic needle – 18 gauge  General Supply Used for occlusion cuff apparatus
Medium binder clip General Supply Used for occlusion cuff apparatus

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Machin, D. R., Leary, M. E., He, Y., Shiu, Y., Tanaka, H., Donato, A. J. Ultrasound Assessment of Flow-Mediated Dilation of the Brachial and Superficial Femoral Arteries in Rats. J. Vis. Exp. (117), e54762, doi:10.3791/54762 (2016).

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