Abdominal adhesions that form after surgery are a major cause of pain, infertility, and hospitalization and reoperation for small bowel obstruction. Our surgical procedure for creating abdominal adhesions in mice is a reliable tool to study the mechanisms underlying the formation of adhesions.
Abdominal adhesions consist of fibrotic tissue that forms in the peritoneal space in response to an inflammatory insult, typically surgery or intraabdominal infection. The precise mechanisms underlying adhesion formation are poorly understood. Many compounds and physical barriers have been tested for their ability to prevent adhesions after surgery with varying levels of success. The mouse and rat are important models for the study of abdominal adhesions. Several different techniques for the creation of adhesions in the mouse and rat exist in the literature. Here we describe a protocol utilizing abrasion of the cecum with sandpaper and sutures placed in the right abdominal sidewall. The mouse is anesthetized and the abdomen is prepped. A midline laparotomy is created and the cecum is identified. Sandpaper is used to gently abrade the surface of the cecum. Next, several figure-of-eight sutures are placed into the peritoneum of the right abdominal sidewall. The abdominal cavity is irrigated, a small amount of starch is applied, and the incision is closed. We have found that this technique produces the most consistent adhesions with the lowest mortality rate.
aderenze addominali sono una forma di tessuto cicatriziale che si formano nell'addome in risposta all'infiammazione, di solito dopo un intervento chirurgico o infezioni intra-addominale. Le adesioni sono una delle principali cause di dolore addominale cronico ed infertilità, e sono la causa più comune di piccola occlusione intestinale 1. La presenza di aderenze fa eseguire una seconda operazione addominale più difficile e aumenta la probabilità di complicazioni 2.
Nonostante anni di ricerca, i meccanismi alla base della formazione di aderenze sono ancora poco chiare. E 'noto che una lesione iniziale alla superficie peritoneale provoca un essudazione di liquido ricco di fibrina, che quindi forma un coagulo che lega le superfici di intestino e la parete addominale insieme 3. Successivamente, fibroblasti e altre cellule migrano nello spazio adesivo e secernono tessuto connettivo 4. Nel corso di mesi o anni l'adesione matura attraverso lo sviluppo di vasi sanguigni e nervi <sup> 5.
Diversi prodotti commerciali esistono che sono progettati per ridurre la formazione di aderenze dopo l'intervento chirurgico addominale (ad esempio, Seprafilm). Tutti questi prodotti agiscono come barriere meccaniche e interrompere la formazione di aderenze impedendo il contatto fisico tra anse intestinali e 6,7 parete addominale. Nonostante le prove da uno studio controllato che una barriera adesione chirurgica riduce la formazione di aderenze 8, molti chirurghi anecdotally sono stati delusi con l'efficacia dei prodotti barriera meccanica.
Attualmente non ci sono terapie anti-adesione a base di droga, che riflette il fatto che i processi precisi coinvolti nella formazione di aderenze sono poco conosciuti. Lo sviluppo di una terapia che si rivolge specificamente agenti cellulari o molecolari coinvolti nella formazione di aderenze richiederà una migliore comprensione degli eventi che sono coinvolti nella formazione di adesione. Diversi gruppos hanno identificato percorsi molecolari che possono essere importanti per la formazione di aderenze 9-11. Modelli animali forniscono un ambiente eccellente per studiare la formazione di aderenze. Molti studi sono stati pubblicati che descrive la creazione chirurgica di adesione in molti animali, soprattutto il ratto e nel topo 6,12-14. Data la nostra esperienza con lo studio della fibrosi nel topo e l'ampia disponibilità di topi transgenici e gli anticorpi di topo-based, abbiamo scelto il topo come modello per lo studio di adesioni. Qui, si segnala la tecnica che abbiamo sviluppato per creare riproducibile e affidabile aderenze addominali nel topo.
I passaggi critici di questa procedura sono: accuratamente abrasione cieco senza provocare la perforazione, suture nella parete laterale addominale, e applicando la giusta quantità di amido. applica carta vetrata Solo al cieco, o per una piccola porzione specifica dell'intestino. Ampio uso di carta vetrata su grandi quantità di piccolo intestino tende a causare una significativa ileo. Fare attenzione a raschiare il cieco con forza sufficiente che la superficie diventa ruvida, ma non così tanto che le lacrime a mu…
The authors have nothing to disclose.
CDM è stata sostenuta dalla American College of Surgeons (ACS) Borsa di studio Resident Research. MSH è stato sostenuto dal California Institute for Regenerative Medicine (CIRM) formazione Fellow clinica concessione TG2-01159. MSH, HPL, e MTL sono stati sostenuti dalla società americana di chirurghi maxillo-facciale (ASMS) / maxillofacciale Chirurghi Foundation (MSF) Research Grant Award. HPL è stato sostenuto da NIH concedere R01 GM087609 e un dono di Ingrid Lai e Bill Shu in onore di Anthony Shu. HPL e MTL sono stati sostenuti dal Laboratorio Hagey Pediatrica Medicina rigenerativa e la Fondazione Oak. MTL è stato sostenuto dal / Fondo Olivier Gunn.
Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" | Fisher Scientific | 14-206-62 | |
Polylined Sterile Field, 18" x 24" | Busse Hospital Disposables | 696 | Cut a rectangular hole of the appropriate size |
Isothesia isoflurane | Henry Schein | 050033 | |
Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" | Fisher Scientific | 22-415-469 | |
Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
Nair depilatory cream | Church & Dwight Co. | 22339-05 | |
Buprenex buprenorphine 0.3 mg/mL | Reckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc. | NDC 12496-0757-5 | |
1 cc insulin syringe, 27G | Becton Dickinson | 329412 | |
Povidone Iodine Prep Solution | Medline | MDS093944H | |
Webcol alcohol prep swabs | Covidien | 6818 | |
General-Purpose Labarotory Labeling tape | VWR | 89097-912 | |
BioGel PI surgical gloves | Mölnlycke Health Care | ALA42675Z | |
Micro Forceps with teeth | Roboz | RS-5150 | |
Fine scissors- sharp | Fine Science Tools | 14060-09 | |
Straight serrated forceps | Fine Science Tools | 11050-10 | |
Castro-Viejo needle driver | Fine Science Tools | 12565-14 | |
100 grit 1/4 sheet sandpaper | ACE Hardware | 1010446 | Cut into strips |
4-0 silk suture, 30", SH needle | Ethicon | K831 | |
7-0 PDS II absorbable monofilament suture, 30", BV-1 needle | Ethicon | Z135 | Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures. |
Rice starch | MP Biomedicals | 102955 | |
0.9% Sodium Chloride Irrigation | Baxter | BHL2F7121 | Warm to 37° C prior to use |
10 mL syringe | Becton Dickinson | 309604 | |
6-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", RB-1 taper needle | Ethicon | J212H | |
6-0 Ethilon nylon monofilament suture, 18", P-3 needle, | Ethicon | 1698G | |
Tegaderm Transparent Film Dressing Frame Style, 6 cm x 7 cm | 3M | 1624W | Cut in half lengthwise |