Il manoscritto descrive i passaggi necessari per eseguire il trapianto di cuore eterotopico nel topo.
E 'ormai più di 40 anni da quando questa tecnica è stata riportata da Corry, Wynn e Russell. Anche se ci sono voluti alcuni anni per altri laboratori per diventare esperti in e utilizzano questa tecnica, è ora ampiamente utilizzato da molti laboratori di tutto il mondo. Una raffinatezza significativo alla tecnica originale è stato sviluppato e riportato nel 2001 da Niimi. Qui descritte sono le tecniche che si sono evoluti per oltre un decennio nelle mani di tre chirurghi (Plenter, Grazia, Pietra) nel nostro centro. Queste tecniche sono ora passati a una nuova generazione di chirurghi e ricercatori.
In gran parte basato sull'esperienza Niimi, le procedure utilizzate sono evoluti nei minimi dettagli – particolari che cercheremo di raccontare qui, in modo che altri possano essere in grado di utilizzare questo modello molto utile. Come Niimi, abbiamo scoperto che un aiuto di video apprendimento è una risorsa inestimabile per il principiante.
In un'epoca in cui è possibile effettuare rene, polmone, fegato e pancreas trapianti nei topi, la pietra angolare di trapianto di organi ricerca di base e immunologia dal 1973 1-4 rimane il cuore del modello di trapianto eterotopico nel topo. Negli anni successivi sono stati pubblicati diversi articoli dettagliare miglioramenti / 5,6 filtri per questa procedura.
Come modello di trapianto di organo solido principalmente vascolarizzato questa procedura è secondo a nessuno. Una volta imparato questo procedimento si presta alla ricerca sulle reazioni di rigetto allogenico 7, lo sviluppo delle vasculopatie croniche 8 e meccanismi di danno da ischemia riperfusione 9.
Le chiavi per imparare correttamente questa procedura sono proprio come qualsiasi altro intervento chirurgico, pazienza da parte dell'istruttore e il tirocinante e attenzione al dettaglio. All'inizio del processo, il nuovo chirurgo troverà che they spenderà molte ore per ogni trapianto. Come l'esperienza è maturata, i tempi chirurgici, e quindi ischemia, si ridurrà drasticamente. Prestare attenzione ai dettagli di ogni passo prima o poi porterà al successo.
Mentre l'istruttore può fare del loro meglio per trasmettere, e per anticipare, tutte le possibili cadute fossa che si possono incontrare nel corso di questi interventi chirurgici, il tirocinante "creativo" probabilmente trovare alcuni di loro!
Le basi della procedura sono i seguenti. Il donatore crescente arco aortico è end-to-side anastomosi all'aorta addominale destinatario e l'arteria polmonare donatore è end-to-side anastomosi al destinatario addominale vena cava inferiore (IVC). Il sangue scorre dall'aorta destinatario in via retrograda attraverso l'aorta donatore alle arterie coronarie. Una volta che il sangue è fluita attraverso il sistema coronarico drena nell'atrio destro attraverso il seno coronarico, viene pompato nel ventricolo destro epoi attraverso l'arteria polmonare nel ricevente IVC. In questo modo il sistema coronarico è fornito sangue arterioso e ritmo sinusale ritorna al trapianto in 1-2 minuti di riperfusione. Poiché le camere sinistro del cuore sono essenzialmente pressione sotto-caricato parete libera ventricolare sinistra si atrofizza nel tempo.
Questa tecnica chirurgica non è facile da padroneggiare, ma una volta imparato è un potente strumento di ricerca. Il ricercatore / chirurgo viene premiato dal coerenza della tecnica e attenzione al dettaglio. Pazienza durante la fase di apprendimento è fondamentale. Come pubblicato da Niimi 3, con l'ausilio di uno strumento di apprendimento video basato ci vuole una media di 11 tentativi per ottenere la prima procedura di successo e 78 tentativi di raggiungere un tasso di successo del 90%. Video sono diventati un importante strumento didattico in chirurgia 11,12.
Risoluzione dei problemi
Sanguinamento dalle anastomosi può verificarsi, e questo è probabilmente dovuto a uno mancanza di una corretta tensione nelle suture, o troppo pochi punti di sutura. Mentre un agente che induce la coagulazione come Gelfoam può essere utile per ridurre le perdite, si raccomanda che il chirurgo deve fare affidamento su una buona tecnica. Congestionato cuore non battere è più comunemente causa di anastomosi che sono troppo stretti, in particolare sul lato venoso. Un non-beating, innesto non perfuso è generalmente causata da una bolla d'aria che ha viaggiato in una delle arterie coronarie. È importante mantenere un campo umido a bagnato per evitare l'ingresso di bolle nei vasi.
Limitazioni della Tecnica
Questa tecnica non è adatto se un ricercatore vuole studiare gli effetti su un cuore pienamente funzionante. Ciò richiederebbe una tecnica di trapianto ortotopico, che fino ad oggi si è dimostrato impossibile da eseguire.
Significative in relazione a metodi esistenti
Se si vuole studiare gli effetti su un completamente vascolarizzato, trapianto di organi solidi nel topo, allora il modello cuore è probabilmente il più semplice da padroneggiare. Esistono modelli murini di polmone, rene e trapianto di fegato, ma sono molto più difficili da imparare e perfetto.
Fasi critiche all'interno del protocollo
E 'di vitale importanza che l'intero spessore pculi compresi avventizia vascolare e l'intima dell'ago di sutura vengono raggiunti. Evertion dei bordi assicura anche che non vi è intima-to-intima contatto, che aiuta nella tenuta e la guarigione delle anastomosi. Un altro fattore estremamente importante è garantire che la tensione delle linee di sutura anastomotica è anche ottimale. Troppo lenta e ci saranno perdite irreversibili, troppo stretto e stenosi di fluire si tradurrà. Se sul lato arterioso questo si tradurrà in scarsa perfusione dell'innesto, se dal lato venoso comporterà un cuore congestionato.
Soprattutto, la ripetizione, la coerenza del procedimento e continua attenzione ai dettagli produrrà grandi risultati e dei dati finanziabili e pubblicabili.
The authors have nothing to disclose.
Gli autori desiderano ringraziare il Dott. Biagio Pietra per il suo precedente lavoro nel nostro laboratorio.
Instrument | Roboz # | Fine Science Tools # | Arosurgical # |
Straight micro-dissecting forcep #5 | RS-5015 | 11295-51 | |
Curved micro-dissecting forcep #7 | RS-5047 | 11297-00 | |
Curved serrated forcep | RS-5137 | 11052-10 | |
Vannas micro-dissecting scissors, short | RS-5610 | 09.140.08 | |
Micro-dissecting scissors, straight, sharp, long | 11.602.11 | ||
Micro spring handle needle holder | 11.549.15 | ||
Straight mosquito forcep | 91308-12 | ||
Micro-dissecting scissors, straight, blunt | RS-5962 | 14078-10 | |
Micro-dissecting scissors, curved, blunt | RS-5981 | 14079-10 | |
Micro retractor | RS-6540 | ||
Instrument tray, 10” x 6 ½” x ¾” | RT-1350S | ||
Silk suture, 5/0, 22.5m spool | 18020-50 | ||
Suture | |||
10/0 nylon | T4A10Q07 | ||
5/0 silk | E19A05N | ||
Gloves | Drapes | ||
Biogel from Medex Supply | Precept, #64-9012-9 | ||
Syringes | Cotton applicators | ||
B-D 1cc insulin, #329424 | Fisher-brand, #23-400-100 | ||
Povidone-Iodine swabs | |||
PDI, #B40600 | |||
4/0 Cotton ties | |||
Domestic cotton autoclaved with instruments |