마우스의 Intralymphatic 면역 및 예방 접종
Summary
예방 및 치료 백신은 종종 노드와 면역 세포의 결과로 가난한 참여 림프로 인해 백신의 주 배수에 강한 면역 반응을 자극하는 데 실패합니다. 림프절 백신의 직접 주사에 의해, 소위 intralymphatic 주입은 백신 효능 강하게 개선 될 수 있으며, 백신의 투여 량을 저감 할 수있다.
Abstract
백신은 일반적으로 면역 반응의 자극을 위해 피하 또는 근육 주사합니다. 이것의 성공은 항원 제시 세포가 원하는 면역 반응의 생성을 위해 림프구와 상호 작용할 수있는 림프절에 백신의 효율적인 배수를 필요로합니다. 강도 및 유도 된 면역 반응의 유형은 밀도 또는 주파수의 상호 작용뿐만 아니라, 미세 환경, 사이토킨, 특히 콘텐츠에 의존한다. 말초 주입 백신만을 분 분획 림프절에 도달 할 때, 마우스 및 인간의 예방 접종 서혜부 림프절, 즉 intralymphatic 주사로 백신의 직접 주입에 의해 수행되었다. 남자에서, 절차는 초음파에 의해 안내된다. 마우스에서, 작은 (5-10 ㎜) 절개, 림프절 지역화 및 집게로 고정화는 마취 된 동물의 서혜부 영역에 만들어지고, 백신의 20 μL의 부피는 카메라 제어하에 주입한다.절개 수술 봉합사를 사용하여 하나의 스티치 닫힙니다. 마우스는 플라스미드 DNA, RNA, 펩타이드, 단백질, 입자, 박테리아뿐만 아니라 보조제 접종하고, 백신의 모든 유형에 대한 면역 반응의 강력한 개선이 관찰되었다. 예방 접종의 intralymphatic 방법은 기존의 예방 접종이 부족 면제 또는 가능한 경우 백신의 양이 한정되어 생산 상황에 특히 적합합니다.
Introduction
백신은 일반적으로 면역 반응의 자극을 위해 피하 또는 근육 주사합니다. 이 절차의 성공은 항원 제시 세포는 T-와 B-세포 반응의 생성을 위해 림프구와 상호 작용할 수있는 림프절에 백신의 효율적인 배수를 필요로합니다. 또, 강도 및 유도 면역 반응의 유형은 밀도 또는 주파수와 같은 상호 작용뿐만 아니라 미세 환경 자체, 사이토 카인, 특히 콘텐츠에 의존한다. 말초 조직에 주입 백신의 단지 작은 분획이 림프절에 도달 할 때, 림프절로 백신의 직접 주입에 의해 생쥐와 인간의 접종은, 사이트가 면역 반응을 생성하고, 수행되었다. 사람에서의 절차는 초음파, 또한 림프 시스템의 시각화 및 진단을위한 이미징 요원의 관리에 사용되는 절차에 의해 안내된다. 마우스에서, 절차는 침습적이다. 여기에, 작은 (5 ~ 10 ㎜) incisioN 마취 된 동물 1의 서혜부 제, 림프 노드는 지역화 포셉 고정화하고, 백신의 10 ~ 20 μL의 부피는 시각 제어에 주입되고, 10 ㎕를 먼저 주사에 사용되는 젊은 생쥐 작은 림프 노드와, 반면에 20 ㎕의 큰 림프절이 림프 세의 노드 또는 이미 끝났다 마우스에 주입 할 수있다. 절개 수술 봉합사를 사용하여 하나의 스티치 닫을 수 있습니다. 이 방법으로, 마우스는 플라스미드 DNA, 3, 메신저 RNA 4, 펩타이드 1,3,5,6, 단백질 7 ~ 10, 11를 입자, 박테리아 (12)뿐만 아니라 보조제 7,13, 면역의 강력한 개선과 예방 접종 백신의 모든 유형에 대한 반응이 관찰되었다. 예방 접종의 intralymphatic 방법은 기존의 예방 접종이 부족한 면역을 생산 또는 사용 가능한 백신의 양이 제한 또는 버전입니다 상황에서 특히 적합하다비용이 많이 드는 예. 인간의, 예방 접종의 intralymphatic 방법은 알레르기 환자 14, 15 또는 암 16-21 환자에 적용되었습니다. 현재의 개념이 intralymphatic 방법 등 근육 및 피하 주사 등의 주사 방법보다 더 침습적 인 것입니다 만, 고통의 인식은 정맥 천자 (15) 후보다 높은 없습니다. 그것은 intralymphatic 예방 접종은 질병 예방 및 치료, 특히 예방 접종의 다른 방법에 대한 대안 또는 보완 될 것으로 예상된다. 이 문서 intralymphatic 예방 접종의 절차가 생쥐에서 수행하는 방법을 상세하게 설명합니다. 설명 모든 절차는 취리히의 주립 수의학 기관의 승인을 스위스 연방 정부의 가이드 라인과 과학적인 목적으로 사용되는 동물의 보호에 관한 지침에 따라 수행 하였다.
Protocol
Representative Results
Discussion
Intralymphatic 예방 접종 및 면역 항체 반응과 T 세포 반응을 모두 자극에 적절한 것으로 표시되었습니다. 이 비디오 문서에서 알 수 있듯이, 예방 접종의 intralymphatic 절차는 생쥐에 강한 면역 반응을 자극하기위한 빠르고 쉬운 방법입니다. 숙련 된 외과 의사가 3 ~ 4 분 동안 절차를 수행 할 수 있습니다. 세션은 또한 하나가 일반적 마취와 봉합을 수행하고 제 외과 절개 및 주입을하고이 외과 의사 사?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
저자는 아이리스 Erdmann의, 바바라 폰 Beust, 줄리아 마르티네즈 마리아 고메즈의 생쥐 intralymphatic 예방 접종의 방법을 개발하는 실험적인 도움에 대해 감사합니다. 우리는이 비디오 제작에 대한 자신의 수술 극장을 사용셔서 또한 Maggy의 아라스와 니콜라 Cesarovic 감사합니다.
Materials
| Ketamine (Ketasol-100) | Graeub AG, Switzerland | Anesthetics | |
| Xylazine (Rompun) | Bayer, Germany | Anesthetics | |
| Viscotears Eye-Gel | Novartis, Switzerland | To keep eyes from drying out during anesthesia. | |
| BD Micro-Fine 0.5 ml | BD Medical, France | 29 G Insulin syringes with permanently attached needles | |
| 6-0 Dermalon Monofilament nylon | Covidien, MA, USA | For sutures (0.7 metric, 18G, 45 cm, Blue) | |
| Curved forceps, 4.5 inch | Polymed, Switzerland | For incision and holding of lymph node | |
| Straight surgical scissors, 4.5 inch | Polymed, Switzerland | For incision | |
| Needle holder, 5.5 inch | Polymed, Switzerland | To close incision with suture | |
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