O ultrassom transabdominal é descrito como um meio eficaz e não invasivo para avaliar o estado reprodutivo no cervo muntjac de Reeves. Esses métodos podem ser utilizados para alcançar o diagnóstico precoce da gravidez e avaliar a viabilidade fetal. As aplicações futuras desta técnica incluem a estimativa da idade gestacional e os efeitos da doença materna no desenvolvimento fetal.
O deer muntjac de Reeves (Muntiacus reevesi) é uma pequena espécie cervid nativa do sudeste da Ásia, e atualmente está sendo investigada como um modelo potencial de transmissão da doença de prípcional e patogênese. A transmissão vertical é uma área de interesse entre pesquisadores que estudam doenças infecciosas, incluindo a doença de príptica, e essas investigações exigem métodos eficientes para avaliar os efeitos da infecção materna no desempenho reprodutivo. O exame ultrasonográfico é uma ferramenta bem estabelecida para diagnosticar a gravidez e avaliar a saúde fetal em muitas espécies animais1-7, incluindo várias espécies de cervidscultivados 8-19, no entanto essa técnica não foi descrita no veado muntjac de Reeves. Aqui descrevemos a aplicação de ultrassom transabdominal para detectar a gravidez em muntjac faz e avaliar o crescimento e desenvolvimento fetal ao longo do período gestacional. Com esse procedimento, os animais gestantes foram identificados até 35 dias após o emparelhamento doe-buck e este foi um meio eficaz para monitorar a gravidez com segurança em intervalos regulares. Os objetivos futuros deste trabalho incluirão o estabelecimento de referências normais de medição fetal para estimativa da idade gestacional, determinação da sensibilidade e especificidade da técnica para o diagnóstico da gravidez em vários estágios da gestação e identificação de variações no crescimento e desenvolvimento fetal em diferentes condições experimentais.
O exame ultrasonográfico é um método bem descrito de diagnóstico de gravidez em bovinos1, ovinos2,3, cabras4,cavalos5, animaiscompanheiros 6,7e outras espécies animais domésticos. Esta modalidade de imagem também foi identificada como uma ferramenta valiosa para a detecção da gravidez e a estimativa da idade fetal em várias espécies de cervids cativos, incluindo veadosfallow 8-11, veado vermelho12-16, veado de ika hokkaido17e rena18,19. Em muitos casos, a ultrassonografia tem produzido taxas de precisão mais altas do que outros mecanismos de detecção da gravidez, como progesterona sémum ou análise de glicoproteína associada à gravidez9,18. Além disso, a visualização ultrasonográfica do trato reprodutivo pode fornecer informações adicionais sobre viabilidade fetal, idade gestacional e identificação de anormalidades no desenvolvimento que de outra forma seriam difíceis de avaliar. A utilidade da ultrassonografia para avaliação do estado reprodutivo sugere que essa metodologia deve ser adaptada a outras espécies nas quais são utilizados programas de reprodução ativa.
O cervo muntjac de Reeves(Muntiacus reevesi)é uma pequena espécie cervid nativa do sudeste da Ásia20. Embora o ciclo reprodutivo desses animais não seja bem caracterizado em seus territórios nativos, estudos de populações selvagens em partes do sul da Inglaterra melhoraram a compreensão de seus padrões de reprodução20. Ao contrário da maioria dos cervids, o muntjac de Reeves parece procriar o ano todo, sem picos aparentes de fawning sazonal20-22. Muntjac fêmea tipicamente dá à luz um único fawn após um período de gestação de 210 dias, e entra de forma confiável em um estrus pós-parto dentro de 24 horas20-22. Será que isso não concebe durante este período pós-parto retornará a estrus aproximadamente 24-25 dias depois20. Em situações cativas, a reprodução é tipicamente alcançada por moradias com um ou mais homens intactos. Este sistema produz taxas de concepção satisfatórias e requer pouca habilidade técnica para o pessoal, porém as datas exatas de reprodução são difíceis, se não impossíveis, de determinar.
Muntjac são comumente usados em estudos citogenéticos devido à ampla gama de números de cromossomo diploides e alta taxa de diversificação karyotípica entre as diferentes espécies23. Esses animais também estão sendo investigados atualmente como modelo de patogênese e transmissão da doença de prígion, com particular interesse colocado no estudo da transmissão vertical da doença de desomânudo crônico (CWD) em cervids. A importância do muntjac em várias aplicações de pesquisa diferentes sugere que tecnologias reprodutivas aprimoradas devem ser estabelecidas para complementar os procedimentos investigativos atuais. Especificamente, mecanismos não invasivos para avaliar o período gestacional poderiam potencialmente elucidar variações críticas no desempenho reprodutivo e no crescimento e desenvolvimento fetal em diferentes condições experimentais. Além disso, o desenvolvimento de referências de medição fetal em tempo real seria potencialmente valioso na estimativa da idade gestacional em situações em que as datas de reprodução não podem ser determinadas. Estudos anteriores descreveram mecanismos para o uso de medidas fetais, como comprimento de alcatra -coroa (CRL), profundidade torácica (CD) e comprimento da cabeça (HL) para estimar o estágio aproximado da gestação nas espécies cervid11-14, 16,17. Além disso, alguns desses estudos também estabeleceram diretrizes descrevendo quando marcos específicos do desenvolvimento, como a mineralização esquelética ou batimentos cardíacos fetais, podem ser identificados8-19. Embora esses dados possam ser úteis para ajudar a orientar a análise de ultrassom reprodutivo no muntjac, a maioria das outras espécies cervidas estudadas têm tamanho corporal muito maior e períodos gestacionais mais longos, reduzindo o valor translacional desses estudos para aplicações de muntjac.
O protocolo aqui descrito descreve a ultrassonografia transabdominal do muntjac feminino para fins de diagnóstico e monitoramento da gravidez. A execução bem-sucedida deste protocolo pode facilitar a detecção precoce da gravidez e a avaliação do crescimento e desenvolvimento fetal. Esta técnica possui aplicações valiosas na condução de estudos que investigam a reprodução, no desenvolvimento do útero, ou transmissão vertical de doenças infecciosas em um pequeno modelo cervid e também pode ser útil para fins clínicos em operações de reprodução em cativeiro.
Este protocolo descreve a aplicação da ultrassonografia transabdominal para diagnóstico de gravidez no cervo muntjac de Reeves. Consistente com outros estudos de ultrassom, equipamentos adequados e proficiência técnica são imprescindíveis para um exame reprodutivo bem sucedido do doe muntjac. Uma revisão cuidadosa da anatomia básica dos mamíferos, os princípios físicos do ultrassom diagnóstico e a aparência ultrasonográfica típica das vísceras abdominais ajudarão na redução dos diagnósticos equivocad…
The authors have nothing to disclose.
Os autores desejam agradecer a Jeanette Hayes-Klug e Kelly Anderson pela gestão da colônia muntjac, Dr. Alan Young por nos apresentarem ao muntjac e ao Sr. Cleve Tedford da Cervid Solutions Inc. por fornecerem a semente muntjac para este projeto. Este trabalho foi apoiado pela concessão do NIH R01AI093634.
Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Iowa | NADA 135-780 | |
Azaperone tartrate (0.035 mg/kg) | ZooPharm | ||
Medetomidine HCl (0.04 mg/kg) | ZooPharm | ||
Ultrasound contact gel | Medline, Mundelein, Illinois | MDS092005 | |
Atipamezole hydrochloride (Antisedan) (0.25 mg/kg) | Orion Corporation, Espoo, Finland | NADA 141-033 | |
Table 2 Equipment | |||
Name of Equipment | Company | Catalog Number | Comments |
V-trough (optional) | N/A | N/A | Animal may be supported in dorsal recumbency on a standard examination table or other surface without the use of a V-trough |
Electrical clippers or razor blades for hair removal | Oster, McMinnville, Tennessee | 78005-140 | |
Ultrasound system: Ibex Pro portable ultrasound | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | Ibex Pro | |
5-10 MHz transducer: CL3.8 5-2.5 MHz 60 mm curved linear array | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | 290420 | |
3 ml syringes | Covidien | 1.18E+09 | |
22 G needles | Covidien | 8.88E+09 |