Все более широкое использование данио в качестве животной модели требует разработки эффективных методов для доставки известных количеств соединений и решений. Желудочный зонд описанной ниже процедуры позволяет пероральной доставки точной объемы раствора надежно, безопасно и эффективно для взрослых данио.
Данио стала важной в естественных условиях модель в биомедицинских исследованиях. Эффективные методы должны быть разработаны и использованы для доставки соединений или агентов в растворах для научных исследований. Современные методы введения соединений устно взрослых данио являются неточными из-за изменчивости добровольное потребление рыбы. Зонда была разработана процедура обеспечивает точное количество инфекционных агентов данио для исследования в биомедицинских исследованиях. Взрослых данио в течение 6-месячного возраста анестезировали 150 мг / л буфера MS-222 и которым вводили 5 мкл раствора с использованием гибких труб имплантации катетера прикреплен к сокращению 22-G иглы. Гибкий шланг был опущен в полости рта данио до кончика трубки продлил мимо жабры (около 1 см). Затем раствор медленно вводят в желудочно-кишечном тракте. Этот метод был эффективным 88% времени, с рыбой восстановления без осложнений. ЭтоПроцедура также эффективна, как один человек может зондовым 20-30 рыб в течение одного часа. Этот метод может использоваться, чтобы точно управлять средств по поводу инфекционных заболеваний исследования или исследования других соединений в взрослых данио.
Современные методы введения соединений устно данио включают введение соединений верхним покрытием на корм, смешанный в желатиновые диеты 1, bioencapsulated в артемии 2, смешанные с липидной инкапсулированные диет 3, воск спрей бисера 4 и через клейковины на основе диеты. 5 Ограничения этих методов перорального введения включают высокие темпы выщелачивания и неполным или непредсказуемые соединения потребления отдельных рыб. Эти переменные являются проблематичным, поскольку в исследованиях инфекционных болезней, зная, инфекционная доза вводится рыба может иметь решающее значение для успеха исследования. Кроме того, предыдущие исследования показали, что некоторые соединения вводят в воду ванны вызывают токсическое поражение для рыбок данио жабры перед кишечных эффектов, которые могут находиться под исследование произойти. 6
Зонд является стандартным методом, используемым в других видах лабораторных животных для администрирования точное количество продукта с АКNown концентрации для исследования в биомедицинских и фармацевтических исследований. Лишь недавно методы gavaging данио были описаны в литературе. Один из методов, описанных в двух человек методом с использованием 24-G оболочка катетера прикреплен к 2-20 мкл пипеткой доставить 5 мкл раствора. 7 Метод, описанный была смертность от 8,7% и 39% на первом и втором судебного разбирательства, соответственно, большая часть смертности объясняется беременных самок. Второй зонд использовали методику, описанную тупым наконечником зонда шприцы для введения 5 мкл решение medakas (Oryzias latipes). 8 Информация на смертность не была предоставлена и точный процесс выполнения зонд не был описан. По данным Канадского совета по уходу за животными и данио рерио лаборатории, до 1% от массы тела рыбы можно вводить через зонд. 9,10 Нашей целью была разработка повторяемой, безопасным и эффективным способом доставки точные объемы COMфунтов устно взрослых данио обоих полов и на всех стадиях воспроизводства. Эта процедура будет применяться для любого исследование, в котором точные перорального введения соединения не требуется.
Значение
Этот метод улучшения и обеспечивает несколько преимуществ по сравнению с двумя ранее описанных методов gavaging взрослых данио. Во-первых, использование губки сдерживать рыбы позволяет одному человеку для выполнения процедуры, в отличие от описанных ранее метод, т?…
The authors have nothing to disclose.
Университет Рокфеллера Сравнительный Bioscience Центр оказал поддержку этому проекту. Мы благодарим Janelle Monnas за техническую помощь.
Equipment | |||
A sponge | |||
1-cc luer lock syringe | Becton Dickinson & Co | ||
22-G Micro-Renathane Implantation tubing (cut) | Braintree Scientific, Inc. | ||
1 22-G needle (cut, if needed) | Becton Dickinson & Co | ||
pH meter | Hanna probe | ||
1 scalpel blade | |||
[header] | |||
Reagent/Material | |||
MS-222 (Finquel) | Argent Laboratories |