在合成免疫能力宿主中评估,基于癌症干细胞 (CSC) 的树突状细胞 (DC) 疫苗的抗肿瘤免疫力明显高于使用异质散装肿瘤细胞脉冲的传统 DC 疫苗。
我们用ALDEFLUOR/ALDH作为标记,从穆林黑色素瘤D5合成物到C57BL/6小鼠和鳞状癌SCC7同基因到C3H小鼠,并利用细胞赖氨酸作为抗原来源来脉冲树突状细胞(DCs),确认了其免疫原性。与 DCs 脉冲与 ALDH高 CSC 裂解剂诱导明显更高的保护性抗肿瘤免疫力比 DCs 脉冲与未分类的整个肿瘤细胞裂解的裂解剂在两个模型和肺转移设置和 s .c。肿瘤生长设置,分别。这种现象是由于CSC疫苗引起的幽默以及细胞抗CSC反应。特别是,从接受CSC-DC疫苗的宿主分离出的脾脏细胞产生的IFNγ和GM-CSF量明显高于从接受未分类肿瘤细胞催化脉冲直流疫苗的宿主中分离的脾酸细胞。这些结果支持了开发一种基于 CSC 的自体治疗疫苗,用于辅助环境下临床使用的努力。
癌症干细胞对常规化疗和放疗具有相对的抗药性。另一方面,这种细胞群可能是传统癌症疗法1-4后导致癌症复发和进展的细胞。由于在癌症干细胞上缺乏分化肿瘤抗原的表达,癌症干细胞可能逃避目前癌症治疗的免疫干预,这些干预主要针对分化肿瘤细胞上的抗原。因此,制定专门针对和摧毁癌症干细胞的新战略可能有望提高当前癌症治疗的疗效。为此,我们从两个动物肿瘤(黑色素瘤D5和鳞状细胞癌SCC7)中分离出富含癌症干细胞(CSC)的群体,并利用它们作为抗原源脉冲抗原呈现细胞(树突状细胞,DC),以准备CSC-TPDC疫苗。然后,我们分别对CSC-TPDC疫苗在合成免疫能力宿主、B6小鼠和C3H小鼠中诱导的抗肿瘤免疫进行了评估。CSC-TPDC 诱导的抗肿瘤功效与传统的 DC 疫苗与来自未分类的异质肿瘤细胞 (H-TPDC) 的裂解剂进行了比较,该疫苗以前已被我们组5,6以及临床前研究和临床试验中的其他研究人员 7 使用。
免疫功能不强的宿主,如SCID小鼠,由于宿主内部缺乏适应性免疫力,排除了对CSC的免疫学评估。在这项研究中,我们评估了CSC在免疫能力宿主中的免疫原性,它可以更密切地模仿患者设置。与未经选用的肿瘤细胞利萨酸盐脉冲DC相比,富含浓缩的CS是免疫性的,当其利萨特作为疫苗加载到DC中时,可以诱导更有效的肿瘤保护免疫力。 从机械学上讲,保护是通过选择性地诱导CSC反应抗体和T细胞8 以及生产1型细胞因子, 如 IFNγ和GM-CSF而给予的。
目前大多数免疫疗法,包括树突状细胞基疫苗和采用T细胞转移,都旨在针对肿瘤分化抗原。因此,可能无法表达这些分化抗原的CSC可能逃脱这些免疫靶向。相比之下,专门针对癌症干细胞的CSC疫苗可能会破坏癌细胞的特殊群体,从而通过防止肿瘤复发和转移来提高疫苗的疗效。
在培养的肿瘤细胞和新收获的肿瘤中,我们根据高醛脱氢酶活性,通过流动细胞学识别出CSC富集人群。这种ALDH高 细胞可以通过流分拣来分离,用作脉冲直流以产生CSC-TPDC的抗原源。 与从培养肿瘤细胞中分离出来的ALDH高 细胞 与从新收获的肿瘤中分离出来的比较表明,抗CSC免疫8的诱导期没有显著差异。这些结果表明,有可能使用从培养肿瘤细胞或从新收获的肿瘤中分离出来用于临床应用的CSC。
为了在临床上相关,疫苗需要在治疗环境中检查。这些实验正在我们的实验室进行。
The authors have nothing to disclose.
这项工作得到了密歇根大学综合癌症中心的威尔和珍妮·考德威尔捐赠研究基金的支持,部分得到了NIH授予CA82529和吉尔森·朗根博基金会的支持。
ALDHEFLOUR KIT | Stemcell Technologies | 1700 |
Murine IL-4 | Pepro Tech | 214-14 |
Murine GM-CSF | Pepro Tech | 315-03 |
Mouse IFN-ɣ ELISA KIT | BD Biosciences | 555138 |
Mouse GM-CSF ELISA KIT | BD Biosciences | 555167 |
OptiPrep Density Gradient Medium | Sigma Aldrich | D1556 |
BD OptEIA TMB Substrated Reagent Set | BD Biosciences | 555214 |
Equipment | ||
BD FACS Aria Cell Sorter | BD Biosciences | 336834 |
Kcjunior | Bio-Tek Instruments | 176058 |