Doğrudan intrahippocampal mikroenjeksiyon ile hipokampal bağımlı uzaysal çalışma belleği Modülasyon, eşlik ve takip<em> In vivo</emBilinçli davranıyor hayvanlarda metabolitleri> mikrodiyaliz.
Glikoz metabolizması gibi 2-deoksiglukoz ve fonksiyonel manyetik rezonans görüntüleme gibi yöntemler temelini oluşturan, yerel sinirsel aktivite için kullanışlı bir belirteçtir. Bununla birlikte, hayvan modellerinde bu gibi yöntemlerin kullanımı anestezi gerektirir ve dolayısıyla her iki beyin durum değiştirir ve davranışsal önlemler önler. Alternatif bir yöntem, uyanık, serbest hayvanlarda glikoz, laktat ve ilgili metabolitlerin beyin hücre dışı sıvı konsantrasyonunun sürekli ölçülmesi almak üzere in vivo mikrodiyaliz olarak kullanılmasıdır. Spesifik beyin bölgelerinin ve / veya akut farmakolojik manipülasyon güvenmek için tasarlanmıştır görevleri ile kombine edildiğinde Bu teknik özellikle yararlıdır, örneğin, bir mekansal çalışan bellek görevi (spontan ardalanması) sırasında hipokampal ölçümler laktat ekstrasellüler glukoz ve yükselişi bir dalış göstermek gelişmiş glikoliz 1,2 ve intrahippocampal insülin uygulamasının düşündüren hafızayı geliştirir ve hipokampal glikol artırır hemYsis 3. Insülin gibi maddeler metabolitleri ölçmek için kullanılan aynı mikrodiyaliz prob ile hipokampus teslim edilebilir. Hipokampal fonksiyonun bir ölçümü olarak spontan arda kullanım görev performansını ve metabolizmasını değiştirmek her ikisi de bütün bunlar stresli motivasyon (örneğin, ayak şoku), kısıtlama, veya ödülleri (örneğin, yiyecek), herhangi bir karıştırmak önlemek için tasarlanmıştır, bu görev, ayrıca bir sağlar tedavinin nonspesifik etkileri kontrolüne izin motor aktivite ölçer. Kombine, bu yöntemler davranışlarını düzenleyen nörokimyasal ve metabolik değişkenler doğrudan ölçüm izin verir.
Mikrodiyaliz kullanılan tüm .2 çözeltileri um filtre kullanılarak, hemen kullanım öncesi filtre edilmelidir. Kılavuz kanül içine prob yerleştirilmesi sonra, o akışı engellenmemiş olduğunu ve örnek toplama oluştuğunu doğrulamak için gözlemlemek. Akış yerleştirilmesi sonra durursa, en muhtemel nedeni yerleştirilmesine yetersiz bakım nedeniyle prob membran hasarı ve taze bir prob ikame edilmelidir.
Yukarıda belirtildiği gibi, bu yöntemlerin önemli bir avantaj uya…
The authors have nothing to disclose.
Bu çalışma NIH / NIDDK (ECM DK077106) tarafından desteklenmiştir.
The majority of reagents are standard laboratory grade and can be obtained from a supplier of choice. Similarly, equipment such as syringe pumps and tubing can be used from any of several manufacturers. Specific items used here for which details are important include: |
|||
CMA 12 microdialysis probes | CMA/ Microdialysis | CMA-12-XXX | These are available in various membrane lengths and cutoffs, indicated by specific codes in the ‘XXX.’ |
Human insulin (Humulin) | Eli Lilly | N/a | |
Liquid swivel | Instech | 375/D/22QM | This specific swivel has very low torque and internal volume, as well as a nonreactive quartz lining. |