胆固醇检测到定量,从培养细胞的胆固醇流出率和血浆受体的能力,接受从细胞释放的胆固醇。该法由标记细胞内池和胆固醇释放到细胞外受体之间的胆固醇,胆固醇平衡。
细胞中胆固醇的含量必须保持在非常紧张的限制,过多或过少的胆固醇在一个细胞在细胞膜破坏,细胞凋亡和坏死1。细胞可以从细胞内合成和血浆脂蛋白胆固醇,这两个来源是足够充分满足细胞胆固醇的要求。胆固醇的合成和吸收的过程中,严格监管和胆固醇的不足之处是罕见的2。过多的胆固醇是比较常见的问题3。细胞与肝细胞的异常和肾上腺皮质细胞在一定程度上,都无法降低胆固醇。细胞有两种选择,以降低他们的胆固醇含量:转换成胆固醇酯,能力有限的选项中的胆固醇,胆固醇酯细胞超载也是有毒,和胆固醇流出,潜在的无限容量的选择。胆固醇外流是一个规范的IFIC过程中,细胞内的转运,如三磷酸腺苷结合盒转运蛋白体A1(ABCA1)和G1(ABCG1的)和清道夫受体B1型监管。血浆中的胆固醇的天然受体是高密度脂蛋白(HDL)和载脂蛋白AI。
胆固醇外流试验设计定量从培养细胞的胆固醇流出率。它测量的能力,以维持细胞胆固醇流出和/或血浆受体的能力,接受从细胞释放的胆固醇。该法包括以下步骤。步骤1:标记细胞内胆固醇含血清培养基中加入标记的胆固醇,并与细胞孵育24-48小时。这一步,可装载细胞与胆固醇结合。第2步:在无血清培养基培养细胞之间的所有细胞内胆固醇池标记的胆固醇平衡。此阶段可结合激活细胞CHolesterol转运。第三步:培养细胞与胞外受体和定量标记的胆固醇从细胞受体的运动。如果胆固醇的前体被用来标记新合成的胆固醇,第四步,胆固醇的净化,可能需要。
该法提供了以下信息:(i)一个特定的治疗(一个突变,敲下来,过度或治疗)如何影响细胞的能力流出胆固醇和(ii)如何接受胆固醇血浆受体的能力受疾病或治疗。这种方法通常用于研究心血管,代谢和神经退行性疾病,传染病和生殖系统疾病方面。
所描述的方法,测量胆固醇流出是用来衡量运动的胆固醇从细胞到细胞外的胆固醇受体。了解这种方法有几个关键因素。
标签和平衡
中所述的方法被添加到标记的胆固醇血清含药血清。虽然从来没有详细调查,这是假设纳入血清脂蛋白胆固醇和他们采取由细胞组成。重要的是让脂蛋白足够的时间采取了从脂蛋白胆固醇移动到细胞膜。一般24小时的标签是足?…
The authors have nothing to disclose.
这项工作得到了国家健康与医学研究委员会(NHMRC)澳大利亚(526615和545906)和部分赠款,由维多利亚州政府的OIS计划。 DS是NHMRC研究员。