Мы демонстрируем металлирование, очистка и характеристика комплексов лантанидов. Комплексы, описанные здесь могут быть сопряженными с макромолекулами включить отслеживание этих молекул с помощью магнитно-резонансной томографии.
Polyaminopolycarboxylate основе лигандов обычно используются для хелатных ионов лантанидов, и в результате комплексы могут использоваться в качестве контрастных агентов для магнитно-резонансной томографии (МРТ). Многие коммерчески доступные лигандов особенно полезны, поскольку они содержат функциональные группы, которые позволяют быстро, высокой чистоты и высокоурожайных конъюгации макромолекул и биомолекул с помощью амин-реактивного активированных эфиров и изотиоцианата групп или тиол-реактивного малеимидов. Хотя металлирование этих лигандов считается общеизвестным в области bioconjugation химии, тонкие различия в металлирование процедуры должны быть приняты во внимание при выборе металла исходных материалов. Кроме того, несколько вариантов для очистки и характеристики существует, и выбор наиболее эффективных процедур частично зависит от выбора исходных материалов. Эти тонкие различия часто пренебрегают в опубликованных протоколах. Здесь, наша цель заключается в демонстрации общих методов металлирование, очистка и характеристика комплексов лантанидов, которые могут быть использованы в качестве контрастных агентов для МРТ (рис. 1). Мы ожидаем, что эта публикация поможет биомедицинских ученые включить лантаноидов реакций комплексообразования в свой репертуар наиболее часто используемых реакций, облегчая выбор исходных материалов и методов очистки.
Учитывая растущее количество публикаций, которые включают лантаноидов основе контрастных веществ 4-14, важно, что приняты меры по подготовке, очистке, и характеризующие продукции, чтобы обеспечить воспроизводимые и сопоставимые результаты. Эти комплексы часто считается сложной, …
The authors have nothing to disclose.
Мы выражаем глубокую признательность запуска средства из Wayne State University (MJA), грант Американского фонда исследований старения (SMV) и Путь к независимости Карьера Переход Award (R00EB007129) из Национального института биомедицинской визуализации и биоинженерии из Национальных институтов здравоохранения (MJA).
Reagents and Equipment | Company | Catalogue number |
---|---|---|
EuCl3•6H2O | Sigma-Aldrich | 203254-5G |
p-SCN-Bn-DTPA | Macrocyclics | B-305 |
ammonium hydroxide | EMD | AX1303-3 |
Spectra/Por Biotech Cellulose Ester (CE) Dialysis Membrane – 500 D MWCO | Fisher Scientific | 68-671-24 |
Millipore IC Millex-LG Filter Units | Fisher Scientific | SLLG C13 NL |
xylenol orange tetrasodium salt | Alfa Aesar | 41379 |
acetic acid | Fluka | 49199 |
D2O | Cambridge Isotope Laboratories, Inc. | DLM-4-25 |
water purifier | ELGA | Purelab Ultra |
high performance liquid chromatography and mass spectrometry | Shimadzu | LCMS-2010EV |
relaxation time analyzer | Bruker | mq60 minispec |
UV-vis spectrophotometer | Fisher Scientific | 20-624-00092 |
freeze dryer | Fisher Scientific | 10-030-133 |
pH meter | Hanna Instruments | HI 221 |
spectrofluorometer | HORIBA Jobin Yvon | Fluoromax-4 |
Molecular Weight Calculator version 6.46 by Matthew Monroe, downloaded October 17, 2009 | http://ncrr.pnl.gov/software/ | Molecular Weight Calculator |