O Colon ascendens Stent peritonite (CASP) é um modelo altamente padronizado para sepse abdominal polimicrobianas em roedores. Este artigo descreve o procedimento cirúrgico de CASP. O modelo CASP e suas variantes permitem a investigação sistemática de vários problemas a respeito do assunto da sepse.
Sepse continua sendo um problema persistente em unidades de terapia intensiva em todo o mundo. Compreensão dos mecanismos complexos da sepse é a condição prévia para o estabelecimento de novas abordagens terapêuticas nesta área. Portanto, os modelos animais são necessários que são capazes de mimetizar a doença humana e também suficientemente lidar com questões científicas. O Colon ascendens Stent peritonite (CASP) é um modelo altamente padronizado para sepse abdominal polimicrobianas em roedores. Neste modelo, um stent de pequeno porte é cirurgicamente inserido no cólon ascendente de camundongos ou ratos levando a um vazamento contínuo de bactérias intestinais na cavidade peritoneal. O procedimento resulta em bacteremia, peritonite sistêmica, infecção por bactérias do intestino de órgãos e liberação sistêmica, mas também locais de diversas citocinas pró e anti-inflamatório. A letalidade da CASP pode ser controlado pelo diâmetro do stent inserido. Uma variante deste modelo, o CASP chamados com a intervenção (Caspi), levanta oportunidade para remover o foco séptico por uma segunda operação de acordo com procedimentos comuns na prática clínica. CASP é um modelo facilmente aprendida e altamente reprodutível, que imita o curso clínico da sepse abdominal. Ele leva jeito para o estudo sobre as questões em vários campos científicos, por exemplo imunologia, Infecciologia, ou cirurgia.
CASP é um modelo de sepse polimicrobiana abdominal que atende a maioria dos critérios postulados para um modelo de sepse valioso: CASP pode ser realizado em pequenos animais, é altamente reprodutível, fácil de monitorar através de parâmetros padrão, fornece boas possibilidades de ler, e imita situações clínicas de sepse abdominal. Em um estudo comparativo que pudéssemos mostrar que CASP leva a peritonite difusa com infecção precoce e de forma constante e inflamação sistêmica crescente (síndrome da resposta inflamatória sistêmica), enquanto a ligadura cecal e punção (CLP) revela um modelo de intra-abdominal com formação de abscesso sustentado e menores sinais de inflamação sistêmica (1). A técnica de Caspi apresenta a possibilidade de simular a evolução clínica da peritonite com saneamento foco consecutivos cirúrgica, que é o princípio mais importante terapêutica em humanos. CASP pode ser aplicada para todas as questões em torno de sepsis ou peritonite e, portanto, útil para todas as disciplinas que lidem com pesquisa sepse, por exemplo, imunologia, farmacologia, cirurgia, medicina intensiva, etc Uma seleção de publicações sobre diferentes temas de sepse usando o modelo CASP é dado abaixo (1-14).
Ao começar com a CASP, deve estar ciente de que alguma prática é necessária para executar a operação exatamente e rapidamente. Experiência cirúrgica pode ser útil mas não é necessário. Recomendamos detecção de letalidade como um parâmetro para o desempenho correto do CASP. Deve-se começar com CASP 14G como um stent grande é mais fácil de manusear do que um mais fino. Um cirurgião CASP treinado é capaz de operar um rato dentro de 10 minutos. Antes de iniciar qualquer experimento, você deve se certificar que você está perto esse período. Quando você ganha alguma experiência com o procedimento cirúrgico, você deve conduzir uma cinética de sobrevivência para verificar suas habilidades. 14G CASP deve resultar em uma letalidade de 100%. Iniciantes em nosso laboratório para provar que eles são capazes de gerar uma letalidade de 100% com CASP 14G antes de começar com experimentos. Além disso bacteriologia, e medidas de citocinas devem ser realizados para verificar a sepse. Se você tiver problemas no início com as etapas de microcirurgia da CASP, o uso de lentes de aumento ou um microscópio cirúrgico pode ser útil. Mas em princípio, CASP pode ser bem feita sem esses utilitários. Para a reprodução de nossas taxas de sobrevivência, é absolutamente necessário que os mesmos materiais, especialmente os stents (BD Venflon, veja abaixo), são utilizados. Caso contrário, as variações substanciais dos resultados são possíveis. Além disso, sugerimos que não pode haver variações dos resultados, dependendo, por exemplo, a individualidade do cirurgião. No entanto, a influência de fatores como o que deve ser pequena.
Em resumo, CASP é um praticável, modelo de sepse simples, reprodutível e valioso que imita de perto a situação clínica de sepse abdominal. É, portanto, adequado para todos os domínios da investigação sepse.
The authors have nothing to disclose.
Os autores agradecem Nico Zantl, Klaus Pfeffer, e Bernhard Holzmann. Este estudo foi apoiado pelo Deutsche Forschungsgemeinschaft, Bonn-Bad Godesberg, Alemanha (GRK-840; Vo 450/10-1).
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
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Narcotic fluid | Mix 0.5 mL Rompun with 4.0 mL Ketanest, and add 5.5 mL of saline solution (0.9%). For complete anesthesia, inject intraperitoneally 10 μL/g body weight | |||
Rompun (20 mg/ml Xylazine) | Bayer AG 51368 Leverkusen, Germany | |||
Ketanest (25mg/ml Esketamine) | Pfizer Pharma GmbH, 10785 Berlin, Germany | 647028001E | ||
BD Venflon 18GA (1,2x45mm, 80ml/min) | BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ USA 07417 | 391457 | ||
BD Venflon 16GA (1,7x45mm, 180ml/min) | BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ USA 07417 | 391455 | ||
BD Venflon 14GA (2,0x45mm, 270ml/min) | BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ USA 07417 | 391456 | ||
Catgut Polyester 4/0 white, non absorbable | Catgut GmbH, 08258 Markneukirchen, Germany | 17218113 | ||
Mariderm black 7/0, non absorbable | Catgut GmbH, 08258 Markneukirchen, Germany | 18104900 |