Induction et notation clinique de chronique récurrente encéphalomyélite allergique expérimentale

Summary

Cette vidéo montre le score d'induction et cliniques d'un modèle animal de sclérose en plaques: chronique récurrente encéphalomyélite allergique expérimentale chez des rats DA. La maladie, provoquée par les rats immunisant avec une émulsion contenant la moelle épinière de rats et de toute l'adjuvant complet de Freund, présente des signes cliniques ressemblant à la maladie humaine.

Abstract

La sclérose en plaques (SEP) est une maladie inflammatoire chronique du système nerveux central (SNC) qui touche généralement les jeunes adultes. Elle se caractérise par une démyélinisation et effrayer gliales dans les zones diffusées dans le cerveau et la moelle épinière. Ces lésions modifient la conduction nerveuse et provoquer des déficits neurologiques invalidantes qui varient avec l'emplacement des plaques démyélinisées dans le SNC (paraparésie par exemple, paralysie, cécité, incontinence).

Auto-immune expérimentale (EAE) est un modèle pour la SEP. EAE a été induite par accident chez les êtres humains lors de la vaccination contre la rage, en utilisant des virus cultivés sur la moelle épinière de lapin. Les résidus de la colonne vertébrale avec injecté le virus inactivé induit la maladie du SNC. Suite à ces observations, un premier modèle de l'EAE a été décrit dans des primates non humains immunisés avec un homogénat SNC par Rivers et Schwenther en 1935. EAE a depuis été générés dans une variété d'espèces et peut suivre des cours différents en fonction de l'espèce / souche et les immunisant antigène utilisé. Par exemple, en immunisant des rats Lewis avec la protéine de myéline de base dans l'émulsion avec un adjuvant induit un modèle aigu de l'EAE, tandis que le même antigène induit une maladie chronique chez les porcs Guinée.

Le modèle décrit ici est l'EAE induite par la vaccination contre la moelle des rats DA DA épinière du rat en émulsion dans l'adjuvant complet de Freund. Les rats développent une paralysie ascendante flasque dans les 7-14 jours post-vaccination. Les signes cliniques suivent un cours rémittente pendant plusieurs semaines. Pathologie montre de grandes s'infiltre immunitaires dans le SNC et des plaques de démyélinisation. Considérations particulières pour prendre soin des animaux avec l'EAE sont décrits à la fin de la vidéo.

Protocol

L'induction et la surveillance des maladies chroniques récurrente EAE L'émulsion est un mélange 1:1 de l'antigène en solution aqueuse ajoutée à compléter l'adjuvant complet de Freund. Il est très important d'ajouter l'antigène à l'adjuvant et non l'inverse! Il ya beaucoup de déchets lors de l'injection et une émulsion. Toujours préparer 1,5 ou 2 fois plus que ce dont vous avez besoin. <sp…

Discussion

Il ya quelques considérations importantes pour ce protocole.

Génétique de rats DA diffèrent légèrement selon le sélectionneur, ils sont achetés à partir. Ces différences peuvent augmenter ou diminuer la sensibilité des rats à l'EAE induction. Si vos rats sont plus sensibles à l'EAE, vous voulez réduire la force de la vaccination en utilisant non complétées adjuvant complet de Freund ou encore l'adjuvant incomplet de Freund. Vous pouvez également envisager de réduire la quantité d'émulsion injecté…

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Complete Freund’s Adjuvant	Reagent	Fisher	DF 311-360-5	Manufactured by Difco
Mycobacterium tuberculosis H37Ra	Reagent	Fisher	DF3114-33-8	Manufactured by Difco
DA rat	Animal	Harlan Sprague Dawley		Females, 7-9 weeks old.
Glass syringes – 5 ml	Tool	Fisher	14-823-10 B
Metal bridge – 18G	Tool	Fisher	14-825-17L
Luer Lok plastic syringes – 3 ml	Tool	Becton Dickinson	309585
Needles – 20G 1 1/2	Tool	Fisher	14-826-5C