מאמר זה מתאר את הפרוצדורות המשמשים להכנת זנב גידים עכברוש ללימודי biomechanical ו mechanobiological. מספר תכונות של שלבים עיקריים בהכנת הם הפגינו, עם תחילת החילוץ, חתך מדידת שטח, שטיפה וטעינה החדרה bioreactor.
Abstract
זנב עכברוש גידים (RTTs) הם מודל ביולוגי נפוץ בשימוש ניסיוני במבחנה בתחומי הפיזיולוגיה tendinopathy הגיד. עבודה עם רקמות אלה הוא מאתגר כי הם שבירים מאוד, עד עכשיו לא היה פרוטוקול מפורט בקפדנות על הבידוד שלהם.
כדי להתמודד עם האתגרים הללו, פיתחנו שיטות וכלים כדי להקל על מניפולציה של RTTs ורקמות לשלוט הכדאיות, עקרות ויושרה. מאמר זה מתאר את הפרוצדורות המשמשים להכנת RTTs ללימודי biomechanical ו mechanobiological. העבודה שלנו מחולק לארבעה שלבים עיקריים: מיצוי, חתך מדידת שטח, שטיפה וטעינה החדרה bioreactor.
בכל שלב, כל הנהלים, חומרים מניפולציות מוצגים בפירוט, כך שהם יכולים לשכפל בקלות. יתר על כן, המכשירים ספציפית שפותחה מוצגים: צלחת מניפולציה בשימוש להפריד RTTs, מיקרומטר אופטיים לתפקיד רקמות במהלך המדידה חתך את האזור מערכת עיגון לצרף את RTTs על bioreactor.
לבסוף, אנו מתארים את התוצאות שהתקבלו לאחר בדיקות מרובות כדי לאמת את השיטות שלנו. הערכות כדאיות, עקרות ויושרה להוכיח כי הנהלים שלנו קפדנית דיה מניפולציות של רקמות שביר כגון גידים זנב חולדה.
Protocol
לפני מניפולציה כלשהי, עליך לזהות את קבוצת גידים לשמש תלוי בניסוי שבו אתה מנהל את המנגנון על מזגו של האדם. לענייננו, גידים הגחון נבחרו משום שהם קטנים יותר, ולכן קל יותר לתמרן, כאשר מדידת שטח חתך והתאמת אותם לתוך תא bioreactor. שים לב כ?…
Discussion
על ידי יישום אותן הפרוצדורות, אנחנו יכולים לנהל מגוון רחב של במבחנה על סוג זה של רקמות. כמו למשל, מחקר על ניוון הרקמה בוצע על ידי יישום של גירוי מתחת ל RTTs לתקופה של עשרה ימים. כל יום, הערכנו תכונות הרקמה מכני שאינו הרסני בדיקות הרפיה מתח. בסוף, הצלחנו לשמור וריאציה מ…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
מאמר זה היה נתמך על ידי NSERC גרנט # 299280, IRSST כמו מלגה להורה ג'FRSQ כמו בפרס מחקר לתואר ראשון סטודנט מ 'סיר. אנו מודים יואן Lemieux-Laneville עבור ביצוע מניפולציות מוקלט על וידאו.
Dupuis, D. .Déshydratation de matrices collagéniques reconstruites in vitro: effets sur les propriétés mécaniques et histologiques [dissertation]. , 114-114 (1981).
Bruneau, A., Champagne, N., Cousineau-Pelletier, P., Parent, G., Langelier, E. Preparation of Rat Tail Tendons for Biomechanical and Mechanobiological Studies. J. Vis. Exp. (41), e2176, doi:10.3791/2176 (2010).