Culture de la souris de neurones précurseurs de cellules souches
Summary
Cette vidéo décrit la méthode utilisée pour l'isolement de neuroprecursors du cortex en développement de souris embryonnaires. La procédure pour la suppression des embryons dans l'utérus, la dissection du tissu cortical, et digérant le cortex cérébral est démontré isolés.
Abstract
Primaire cultures de cellules souches neurales sont utiles pour étudier les mécanismes sous-jacents développement du système nerveux central. Recherche sur les cellules souches va augmenter notre compréhension du système nerveux et peut nous permettre de développer des traitements pour les maladies du cerveau actuellement incurables et des blessures. En outre, les cellules souches doivent être utilisés pour la recherche sur les cellules souches destinées à l'étude détaillée des mécanismes de différenciation neuronale et transdifférenciation et les signaux environnementaux et génétiques qui dirigent la spécialisation des cellules dans des types cellulaires particuliers. Cette vidéo montre une technique utilisée pour désagréger les cellules à partir du jour 12,5 prosencéphale embryonnaire dorsale de souris. La procédure de dissection comprend la récolte d'embryons de souris E12.5 de l'utérus, en supprimant la «peau» avec de fines pinces à disséquer, et enfin d'isoler des morceaux de cortex cérébral. Après la dissection, le tissu est digéré et dissociées mécaniquement. Les cellules resuspendues dissociées sont ensuite cultivées en "cellules souches" des médias qui favorise la croissance des cellules souches neurales.
Protocol
Discussion
De grands progrès dans notre compréhension du développement du SNC et biologie des cellules souches ont été rendues possibles par notre capacité à récolter, isoler et cultiver des cellules embryonnaires souches neurales. Cette vidéo montre la dissection du cortex de souris E12.5 cérébrale et la désagrégation ultérieure et la culture d'embryons des cellules souches neurales. Beaucoup d'autres d'autres méthodes similaires ont été employées avec succès par d'autres chercheurs.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Straight Iris Scissors | Tool | FST | 14060-11 | |
| Medium Scissors | Tool | FST | 15024-10 | |
| Micro Scissors | Tool | FST | 15002-08 | |
| Bent Forceps | Tool | FST | 11251-35 |
References
- Currle, D., Cheng, X., Hsu, C., Monuki, E., Flanagan, L., Rebaza, L., Derzic, S., Schwartz, P., Monuki, E. Direct and indirect roles of CNS dorsal midline cells in choroid plexus epithelial formation. Development. 132 (15), 3549-3559 (2005).
