Técnica necesaria para la visualización de los latidos del corazón en adultos y larvas<em> Drosophila</em> Se presentan. Cada etapa de la vida requiere de una metodología diferente.
Abstract
La<em> Drosophila</emCorazón> ha surgido recientemente como un buen modelo de sistema para el examen de los mecanismos genéticos, celulares y moleculares que subyacen a la función en el corazón de miogénica. Un paso clave en el examen de la función del corazón en la mosca es encontrar una manera de acceder al corazón de una manera que preserva su función miogénica al tiempo que permite el órgano corazón que late a ser observados y registrados. Dos métodos diferentes para observar y registrar los latidos del corazón, tanto en larva y adulto<em> Drosophila</em> A continuación se describen. Nuestros semi-intacta la preparación con las moscas adultas permite una visualización clara del corazón abdominal sin la interferencia de la cutícula pigmentada y que cubre los cuerpos grasos. Para grabar el corazón late larval es necesario inmovilizar a la larva, lo que minimiza los movimientos del cuerpo lo que reduce los movimientos de la pared del corazón que no están asociadas con las contracciones del miocardio. Nuestras metodologías de producción de un adulto estable y preparaciones de larvas del corazón que puede vencer a la hora a un ritmo de 3.1 Hz.
Protocol
Antes de empezar Corazones adultos Recién preparar hemolinfa artificial (IA) solución que contiene 108 mm de Na +, 5 mM K +, 2 mM Ca 2 +, 8 mm de MgCl2, 1 mM NaH 2 PO 4, 4 mm de NaHCO3, sacarosa 10 mM, trehalosa 5 mM, HEPES 5 mM (pH 7.1, todos los reactivos de Sigma Chemicals). La sacarosa y la trehalosa, debe añadirse a la AH de las soluciones madre refrigerados antes de su uso con el fin de prevenir la contaminac…
Discussion
El modelo de Drosophila ha demostrado ser una potente herramienta genética que se ha utilizado para tratar una variedad de problemas científicos que van desde el desarrollo embrionario para el aprendizaje y la memoria. Recientemente, este organismo modelo versátil se ha utilizado para investigar la genética de la función cardíaca en la marcha. Un número de intentos de cuantificar la fisiología del corazón en adultos de Drosophila se han basado en observaciones realizadas en las moscas intacta a través de la cu…
Acknowledgements
KO con el apoyo de una beca de la Asociación Americana del Corazón.
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
Micro Dissecting Spring Scissors (curved)
Roboz
RS-5611
Good for gross cuts (Step 3)
Micro Dissecting Spring Scissors (straight)
Roboz
RS-5620
Dumont #55 forceps
Fine Science Tools
11295-51
Dumont #5 forceps
Fine Science Tools
11295-10
Glass Capillaries, 100ul
VWR
53432-921
Glass Capillaries, fine
Science Products
GB100T8P
Pipette Puller
Sutter Equipment
P-97
Both horizontal and vertical pipette pullers will work