פגיעה טראומתית בחוט השדרה משבש את התקשורת עם המוח. כדי לשחזר קישוריות איבד אנו מנצלים שתל העצב ההיקפיים לספק תשתית של סיבים התחדשות בשילוב עם גורמים neurotrophic מטריקס ו-ויסות אנזימים להסיר מולקולות המעכבות כדי לקדם את צמיחת למרחקים ארוכים.
Abstract
פגיעה טראומטית לחוט השדרה (SCI) גורם למוות של נוירונים, הפרעה מוטורית סיבי עצב תחושתי (האקסון) המסלולים והפרעה תקשורת עם המוח. אחת המטרות של המחקר שלנו היא לקדם התחדשות האקסון לשחזר קישוריות ברחבי האתר הנגע. לשם כך פיתחנו העצבים ההיקפית (PN) השתלת טכניקה שבה מגזרים של עצב השת ממוקמות בין במישרין בין הקצוות פגומים של חוט השדרה או משמשים כדי ליצור גשר על פני הנגע. ישנם מספר יתרונות גישה זו בהשוואה השתלת רקמות עצביות אחרות; אקסונים התחדשות יכולה להיות מופנית לעבר אזור יעד ספציפי, מספר מקור התחדשות אקסונים נקבעת בקלות על ידי מעקב אחר טכניקות, השתל יכול לשמש בניסויים אלקטרו למדוד החלמה תפקודית הקשורים אקסונים ב השתל, וניתן להשתמש עצב עצמיים כדי לצמצם את האפשרות של דחיית השתל. במעבדה שלנו אנחנו ביצעו הן עצמיים (התורם והמקבל הם חיים זהה) Heterologous (התורם והמקבל הם בעלי חיים שונים) שתלי עם תוצאות דומות. גישה זו שימש בהצלחה במצבים פגיעה הן כרוניות וחמורות. אקסונים מחדש זה להגיע לסוף דיסטלי של השתל PN לעיתים קרובות אינם מצליחים להרחיב בחזרה לתוך חוט השדרה, כך אנו משתמשים microinjections של chondroitinase להשפיל מולקולות מעכבות הקשורות רקמת הצלקת סביב שטח של SCI. במקביל מצאנו כי מתן אקסוגני צמיחה ומולקולות trophic מעודדת לצמיחה מחודשת axonal מרחק רב יותר אל חוט השדרה. מספר חודשים לאחר ההשתלה לנו לבצע מגוון של בדיקות אנטומיות, התנהגותיות אלקטרו להעריך את ההתאוששות של הפונקציה בחיות חוט השדרה שלנו נפגע. גישה זו ניסיוני שימש בהצלחה בכמה מודלים פגיעה בעמוד השדרה חוט, ברמות שונות של פגיעה במינים שונים (עכבר, עכבר וחתול). חשוב לציין, הגישה העצבים ההיקפית השתלת יעיל בקידום התחדשות על ידי נוירונים חריפה נפצע כרוני.
Protocol
1) הכנה לקראת ניתוח מיקרוסקופי תחנת כירורגית צריך להיות נקי מחוטא עם פתרון לדלל אקונומיקה לפני שתצאו מכשירים וחומרים אביזר. מכשירים יהיה autoclaved 1 יום לפני הניתוח ומאוחסן במיכל סטרילי. הפעל מעקר ביד חם (כלי מדעי פיין) משמ…
Discussion
עבור שחזור של הניסוי חשוב כי רמת פגיעה בחוט השדרה להיות עקבי מן החי אל החי. לכן זה קריטי כי תהליך השדרה המתאים laminectomy להיות מזוהה. כי אנחנו משתמשים hemisection או חיתוך רוחב הנגע מודל למחקר זה אין עמימות בערך בגודל של הנגע או קטעי השדרה ספציפי נפצעו או חסך.
<li s…
Acknowledgements
עבודה זו נתמכה על ידי NIH / NINDS מענקים NS26380 ו NS55976, כריסטופר ודנה ריב קרן וקרן הוימן דניאל למחקר חוט השדרה. אוניברסיטת דרקסל מכללת המרכז לרפואה חוט השדרה המחקר מספק תמיכה עבור מתקני הגרעין משמש כדי להשלים את העבודה הזאת.
Houle, J. D., Amin, A., Cote, M., Lemay, M., Miller, K., Sandrow, H., Santi, L., Shumsky, J., Tom, V. Combining Peripheral Nerve Grafting and Matrix Modulation to Repair the Injured Rat Spinal Cord. J. Vis. Exp. (33), e1324, doi:10.3791/1324 (2009).