Крупномасштабные иммунодетекции белков-мишеней по всей мозга приматов можно, используя новые ткани вложения и секционирования методами в сочетании с использованием творческого аппарата для пакетной окрашивание нескольких свободно плавающих участков на данный момент времени.
Abstract
Иммуногистохимии (IHC) является одним из наиболее широко используемых лабораторных методов для выявления белков-мишеней<em> На месте</em>. Вопросы, касающиеся выражения структура белка-мишени по всему мозгу могут быть сравнительно легко ответить при использовании IHC в маленький мозг, такие, как у грызунов. Однако, отвечая на те же вопросы в крупных и запутанные мозги, такие как приматы представляет ряд проблем. Здесь мы представляем систематический подход к иммунодетекции целевых белков в мозгу взрослого организма обезьяны. Этот подход основан на ткани вложения и секционирования методологии Neuroscience Associates (NSA), а также инструменты, разработанные специально для пакетной окрашивание свободно плавающего разделов. Это приводит в погонах окрашивание множество разделов, которые в конкретный интервал, представляет весь мозг. В результате окрашенные срезы могут быть подвергнуты широкий спектр аналитических процедур с целью определения белка, население нейронов выражения определенного белка.
Protocol
Immunohistochemisty является одним из наиболее широко используемых методов для характеристики экспрессии белка в мозге различных экспериментальных моделях на животных. Это сравнительно легко проводить систематические иммуногистохимического процедур на мозг грызунов и других общих экспери?…
Discussion
Есть два важных шагов в этой процедуре, которые делают крупномасштабные обнаружения белков в весь мозг обезьяны возможно. Одним из них является вложение и секционирования протокол, который остается собственностью знание АНБ. Другое использование окрашивания блюд и корзины предостав?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Мы благодарны Франк Эрвин, Роберта Palmour и сотрудники Фонда поведенческих наук лаборатории расположены в Сент-Китс, Вест-Индии, за их постоянную поддержку нашей работы приматов. Эта работа была поддержана общение с ломкой Х исследовательского фонда Канады (FXRFC) для SZ и – операционной грантов от канадского института исследований в области здравоохранения (АС) и Национальной инженерной и научно-исследовательского совета Канады (МП).
Zangenehpour, S., Burke, M. W., Chaudhuri, A., Ptito, M. Batch Immunostaining for Large-Scale Protein Detection in the Whole Monkey Brain. J. Vis. Exp. (29), e1286, doi:10.3791/1286 (2009).