Банковской мозга и систематический отбор биологического материала является основой для объективной стереологии и максимизирует потенциал данных, полученных от каждого образца.
Abstract
Объективное стереологии это метод точно и эффективно оценки общего количества нейронов (или другого типа клеток) в данной области интересов<sup> 1</sup>. Для достижения этой цели 6-10 систематические разделы должны быть проверены, охватывающих всю структуру. Обычно это включает в себя обработку 1 / 5 разделов, которая оставляет значительное количество материала необработанной. В целях максимального материал, мы предлагаем недорогой метод для сохранения фиксированного ткани как часть долгосрочного плана исследования хранения. Как ткань нарезанные и обработанные для нужного пятна или антитела, альтернативные разделы должны систематически помещаются в антиген сохранять при температуре -20 ° C для последующей обработки. Использование 24-луночных планшетах, разделы могут быть размещены для того, чтобы будущее поиска. Используя этот метод, ткань может храниться и обрабатываться для иммуногистохимии в течение года.
Protocol
Часть 1: Предварительная обработка тканей Ткань должна быть хорошо озарен параформальдегида, глутаральдегида или формалина. Это может быть достигнуто с помощью стандартных transcardial перфузии обычно используется для сбора других органов. В настоящем исследовании тема глубоко седа?…
Discussion
Систематическая выборка недорогой метод предназначен для максимально исследования материала. Это стратегия выборки разработано в соответствии с правилами объективного стереологии, что требует систематического отбора проб во всем регионе. Очень важно, чтобы порядок разделов для каж…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Авторы хотели бы поблагодарить Ikiel Ptito за его постоянную техническую поддержку.
Burke, M. W., Zangenehpour, S., Ptito, M. Brain Banking: Making the Most of your Research Specimens. J. Vis. Exp. (29), e1260, doi:10.3791/1260 (2009).